Афинділік пен ион алмасу хроматографиясының негізгі айырмашылығы мынада: қоспадағы зарядталған немесе зарядталмаған компоненттерді бөлу үшін ұқсастық хроматографиясын пайдалана аламыз, ал қоспадағы зарядталған компоненттерді бөлу үшін ион алмасу хроматографиясын пайдалана аламыз.
Хроматография - қоспадағы қажетті компоненттерді бөлу үшін қолдануға болатын әдіс. Сұйық хроматография, газ хроматографиясы және т.б. сияқты әртүрлі түрлері бар. Сәйкестік хроматографиясы және ион алмасу хроматографиясы сұйық хроматографияның екі ішкі категориясы болып табылады. Сондай-ақ, бұл әдістерде екі кезең бар. Атап айтқанда, олар стационарлық фаза және жылжымалы фаза. Бұл әдістердің мақсаты компоненттерді байланыстыруға байланысты жылжымалы фазада стационарлық фазаның бетіне бөлу болып табылады.
Афинитті хроматография дегеніміз не?
Афинділік хроматографиясы – қоспадағы компоненттерді осы компоненттер арасындағы өзара әрекеттесуге байланысты бөлу үшін қолданатын биохимиялық әдіс.
Бұл жағдайда біз қолданатын өзара әрекеттесулерге мыналар кіреді:
- Антиген-антидене әрекеттесуі
- Фермент-субстрат әрекеттесуі
- Рецептор-лиганды өзара әрекеттесу
- Белок пен нуклеин қышқылының әрекеттесуі
Бұл әдісте біз осы бөлу әдісі үшін молекулалардың молекулалық қасиеттерін қолданамыз. Мұнда біз қажетті қосылыстың стационарлық фазамен сутегі байланысы, иондық әрекеттесу, дисульфидті көпірлер, гидрофобты әрекеттесу және т.б. арқылы әрекеттесуіне мүмкіндік береміз. Стационарлық фазамен әрекеттеспейтін молекулалар алдымен элюцияға ұшырайды. Осылайша, біз оны қоспадан ажырата аламыз. Қажетті қосылыс стационарлық фазаға бекітілген күйінде қалады. Сондықтан, біз оны еріткіш еріткіштің көмегімен ажыратып, оны да бөлу үшін элютті жасай аламыз.
01-сурет: хроматографиялық баған
Афинділік хроматографиясы буферлік ерітіндіні пайдаланып қоспадан затты тазартуда және концентрлеуде пайдалы. Сондай-ақ, бұл қоспадағы қажетсіз заттарды азайтуға көмектеседі. Бұл процесс үшін біз қолданатын аппаратты қарастырғанда, біз стационарлық фазамен толтырылған бағанды пайдалануымыз керек. Содан кейін біз бөлетін биомолекулаларды қамтитын мобильді фазаны жүктеуіміз керек. Әрі қарай, оларды стационарлық фазамен байланыстыруға мүмкіндік беріңіз. Содан кейін жуу буферін пайдаланып, мақсатты емес биомолекулаларды ажырата аламыз, бірақ бөлу процесі сәтті болуы үшін мақсатты молекулалардың стационарлық фазаға жақындығы жоғары болуы керек.
Ион алмасу хроматографиясы дегеніміз не?
Иондық хроматография - иондық заттарды талдауға болатын сұйық хроматографияның бір түрі. Көбінесе біз оны бейорганикалық аниондар мен катиондарды (яғни хлорид пен нитрат аниондары және калий, натрий катиондары) талдау үшін қолданамыз. Бұл аз таралған болса да, біз органикалық иондарды да талдай аламыз. Сонымен қатар, біз бұл әдісті ақуыздарды тазарту үшін пайдалана аламыз, өйткені ақуыздар белгілі бір рН мәндерінде зарядталған молекулалар. Мұнда зарядталған бөлшектер қосыла алатын қатты стационарлық фазаны қолданамыз. Мысалы, біз қатты тірек ретінде шайыр полистирол-дивинилбензол сополимерлерін пайдалана аламыз.
02-сурет: ион алмасу хроматографиясының фазалары
Мұны әрі қарай түсіндіру үшін стационар фазада сульфат аниондары немесе төрттік амин катиондары сияқты бекітілген иондар болады. Осы жүйенің бейтараптығын сақтайтын болсақ, олардың әрқайсысы қарсы ионмен (қарсы зарядты ион) байланысуы керек. Мұнда қарсы ион катион болса, онда жүйені катионалмастырғыш шайыр деп атаймыз. Бірақ, егер қарсы ион анион болса, жүйе анион алмастырғыш шайыр болып табылады.
Ион алмасу процесінің бес негізгі фазасы бар;
- Бастапқы кезең
- Мақсаттың адсорбциясы
- Элюцияның басталуы
- Элюцияның соңы
- Регенерация
Афинитілік пен ион алмасу хроматографиясының айырмашылығы неде?
Афинділік хроматографиясы - бұл компоненттердің өзара әрекеттесуіне байланысты қоспадағы компоненттерді бөлу үшін қолданатын биохимиялық әдіс, ал иондық хроматография - иондық заттарды талдай алатын сұйық хроматографияның бір түрі. Сондықтан жақындық пен ион алмасу хроматографиясының басты айырмашылығы - біз ион алмасу хроматографиясын тек иондық заттарды бөлу үшін пайдалана аламыз, ал аффинділік хроматографиясы зарядталған және зарядсыз бөлшектерді бөлуге қабілетті. Жұмыс принципін қарастырған кезде, аффинділік пен ион алмасу хроматографиясының айырмашылығы, жақындық хроматографиясы мақсатты молекулалардың стационарлық фазаға жоғары жақындыққа ие болуына байланысты жүреді. Дегенмен, ион алмасу хроматографиясы үшін мақсатты молекулалардың стационарлық фаза бетінің зарядына қарама-қарсы заряды болады.
Төмендегі инфографика жақындық пен ион алмасу хроматографиясының арасындағы айырмашылықты жанама салыстыру ретінде көрсетеді.
Қорытынды – жақындық пен ион алмасу хроматографиясы
Қорыта айтқанда, жақындық және ион алмасу хроматографиясы сұйық хроматографиялық әдістердің екі түрі болып табылады. Сәйкестік пен ион алмасу хроматографиясының негізгі айырмашылығы мынада: қоспадағы зарядталған немесе зарядталмаған компоненттерді бөлу үшін ұқсастық хроматографиясын пайдалана аламыз, ал қоспадағы зарядталған компоненттерді бөлу үшін ион алмасу хроматографиясын пайдалана аламыз.
