Микронуклеус пен кометалық талдаудың негізгі айырмашылығы мынада: микронуклеус талдауы мутаген әсерінің нәтижесінде хромосомалық зақымдануды тексеру үшін маңызды, ал комета талдауы жеке жасушалардағы бастапқы ДНҚ зақымдануын анықтау үшін маңызды.
Генотоксикалық талдаулар мутациялар мен хромосомалық аномалиялардың мүмкіндіктерін бағалауға көмектеседі. Генотоксиндерге химиялық заттар мен радиация жатады. Канцерогендер, мутагендер және тератогендер генотоксиндердің негізгі категориялары болып табылады. Олар нүктелік мутациялар, делециялар, бір және екі тізбекті үзілістер, хромосомалық аберрациялар, микронуклеилердің түзілуі, ДНҚ жөндеуі және жасушалық циклдің өзара әрекеттесуі сияқты әртүрлі зақымдарды тудырады. Мұндай жағдайлар әртүрлі ауруларға әкелуі мүмкін, ал генотоксичность талдаулары осы жағдайлардың ықтимал зақымдалуын болдырмайды. Микронуклеус талдауы және кометалық талдау генотоксичность талдауларының екі әдісі болып табылады.
Микронуклеус талдауы дегеніміз не?
Микронуклеус талдауы мутаген әсерінің салдары ретінде хромосомалық зақымдануды бағалауға арналған талдау болып табылады. Шпиндельді және микроядроларды тудыратын химиялық заттарды скринингте маңызды. Микроядролық талдау хромосома құрылымы мен қызметіне кедергі жасаған кезде химиялық заттардың тұрақтылығы туралы ақпаратты береді. Көптеген канцерогендер микронуклеус талдауларында оң нәтиже береді. Талдау процесі химиялық өңдеуді және микроядролық жасушалардың жиілігін өлшеуді қамтиды. Егер микронуклеи жасушаларының санының нормадан тыс артуы байқалса, химиялық зат хромосомалық зақымдануды тудырады деген қорытындыға келеді.
Микронуклеус талдауы әдетте белсенді бөлінетін жасушаларда жүргізіледі. Сондықтан эритроциттер мен жасушалардың бөлінуі арқылы түзілетін сүйек кемігінің дің жасушалары мұндай талдаулар үшін тамаша үміткерлер болып табылады. Олар тұрақты және жылдам айналымды сезінеді. Эритроциттердің шынайы ядролары болмағандықтан, талдаудың соңында микроядролы жасушаларды көбірек көрінеді.
01-сурет: Микроядро талдауын бақылау
Микронуклеус талдаулары үнемді, жылдамырақ, ыңғайлы және орындау үшін азырақ дағдыларды қажет етеді. Олар хромосомалық аберрацияларды сенімді түрде жылдам көрсетеді және хромосомалық зақымдануларды жылдам бағалау үшін өте пайдалы. Микронуклеус талдауының ерекше және әмбебап түрі цитокинезді блоктау микронуклеус цитомы (CBMNcyt) талдауы болып табылады. Жасушалардағы хромосомалық зақымдану мен тұрақсыздықты өлшеу үшін қолайлы талдау болып табылады. Дегенмен, микронуклеусты талдауды қолданудың негізгі мәселесі оның хромосомалық аберрациялардың әртүрлі түрлерін анықтау мүмкін еместігі және талдаудың митоздық жылдамдыққа және жасуша өлімінің пропорциясына әсер етуі, нәтижелердің өзгеруіне әкеледі.
Комета талдауы дегеніміз не?
Бір гельдік электрофорез талдауы ретінде де белгілі комета талдауы ДНҚ зақымдануын анықтаудың қарапайым және сезімтал әдісі болып табылады. Ол эукариоттық жасушалардағы ДНҚ бұзылыстарын өлшейді және биомониторинг пен генотоксикалық тестілеудің стандартты әдісі болып табылады.
Комета талдауы балқу температурасы төмен агарозды суспензиялардағы жасушаларды инкапсуляциялауға, бейтарап немесе сілтілі жағдайларда жасушалардың лизисіне және тоқтатылған лизиске ұшыраған жасушалардың электрофорезіне қатысады. Инкапсуляция процесі кезінде жасушалар балқу температурасы төмен агарозада суспензияланады, ал агароза оларды орнына бекіту үшін көмірсу талшықтарының матрицасын құрайды. Агароза осмостық бейтарап; сондықтан ол ерітінділердің гель арқылы енуіне және жасушаларды бұзбай және жылжытпай әсер етеді. Лизис ерітіндісі жоғары концентрлі сулы тұз ерітіндісі және жуғыш зат болып табылады. Бұл тұз жасушадағы РНҚ мазмұнын бұза отырып, ақуыздар мен жасушадағы байланыс үлгілерін бұзады. Жасушалар бұзады және барлық белоктар, РНҚ, цитоплазмалық және нуклеоплазмалық құрамдас бөліктер, агароздық матрицаны бұзады және диффузиямен ДНҚ-ны қалдырады.
02-сурет: комета талдауы
Электрофорез ерітіндісі сілтілі ерітінді болып табылады, онда ДНҚ қос спиралі денатурацияланады, ал нуклеоид бір тізбекті болады. Бұл процесс кезінде кескіндерді талдау үшін электр өрісі қолданылады. Кескінді талдау ДНҚ мен нуклеоид үшін флуоресценцияның жалпы қарқындылығын өлшейді және екеуін салыстырады. Жалпы құрылым қалған зақымдалмаған ДНҚ-ға сәйкес келетін дөңгелек басы және зақымдалған ДНҚ үшін құйрығы бар кометаға ұқсайды. Күшті сигналдарға байланысты құйрық неғұрлым ашық және ұзағырақ болса, зақымдану деңгейі соғұрлым жоғары болады.
Микронуклеус пен комета талдауының қандай ұқсастықтары бар?
- Микронуклеус пен кометалық талдау үнемді, жылдамырақ, ыңғайлы және азырақ дағдыларды қажет етеді.
- Олар негізінен ДНҚ-да орындалады.
- Екі талдау да мутациялар мен хромосомалық аномалияларды бағалауға көмектеседі.
- Сонымен қатар, екі әдіс те процедураны орындау үшін химиялық заттарды пайдаланады.
Микронуклеус пен кометалық талдаудың айырмашылығы неде?
Микронуклеус талдауы мутаген әсерінің нәтижесінде хромосомалық зақымдануды тексеруде маңызды, ал комета талдауы жеке жасушалардағы бастапқы ДНҚ зақымдануын анықтауда маңызды. Осылайша, бұл микронуклеус пен кометалық талдау арасындағы негізгі айырмашылық. Сондай-ақ микронуклеус талдауы кластогендік пен аневгенділікті анықтау үшін жақсы орнатылған. Комета талдауы жасушалардағы бастапқы ДНҚ зақымдануын анықтау үшін генотоксичность сынағы ретінде пайдаланылады. Сонымен қатар, микроядролық талдау химиялық заттардың тұрақтылығы туралы ақпарат береді, ал комета талдауы бір жасушалы гель электрофорезі болып табылады.
Төмендегі инфографика микронуклеус пен кометалық талдау арасындағы айырмашылықтарды қатар салыстыру үшін кесте түрінде ұсынады.
Қорытынды – Микронуклеус пен комета талдауы
Генотоксикалық талдаулар мутациялар мен хромосомалық аномалиялардың мүмкіндіктерін бағалауға көмектеседі. Микронуклеус және комета талдауы генотоксичность талдауларының екі әдісі болып табылады. Микронуклеус талдауы мутаген әсерінің салдары ретінде хромосомалық зақымдануды бағалайды. Комета талдауы – ДНҚ зақымдануын анықтаудың қарапайым және сезімтал әдісі. Сонымен, бұл микронуклеус пен кометалық талдау арасындағы негізгі айырмашылық. Микронуклеус талдауы шпиндельді және микронуклелерді тудыратын химиялық заттарды скринингте маңызды. Комета талдауы балқу температурасы төмен агарозды суспензиялардағы жасушаларды инкапсуляциялауға, бейтарап немесе сілтілі жағдайларда жасушалардың лизисіне және тоқтатылған лизиске ұшыраған жасушалардың электрофорезіне қатысады.
