BCA мен Брэдфорд талдауының негізгі айырмашылығы мынада: BCA талдауы уақытты қажет етеді және дәлдігі азырақ, ал Брэдфорд талдауы жылдам және дәл.
BCA және Брэдфорд талдауы ақуыз концентрациясын анықтаудың екі талдау әдісі болып табылады. Бұл екі талдаудың талдау принциптері әртүрлі және олардың дәлдіктерінде айырмашылықтар бар.
BCA талдауы дегеніміз не?
BCA талдауы немесе бицинхонин қышқылының талдауы - ерітіндідегі ақуыздың жалпы концентрациясын анықтауда пайдалы биохимиялық талдау. Бұл әдіс сонымен қатар оның өнертапқышы Пол К. Смиттің құрметіне Смит талдауы деп аталады. Бұл аналитикалық әдіс Лоури протеинін талдауға, Брэдфорд ақуыз талдауына немесе биурет реагентіне ұқсастықтарды көрсетеді. Біз берілген үлгідегі жалпы ақуыз концентрациясын үлгі ерітіндісінің жасылдан күлгінге дейінгі түсінің өзгеруі арқылы бақылай аламыз. Бұл түс өзгеруі ақуыздың мазмұнына пропорционалды түрде жүреді. Содан кейін үлгідегі түс қарқындылығы мен ақуыз мазмұнын талдау үшін колориметриялық әдісті пайдалана аламыз.
ВСА ақуызды бағалау әдісі
BCA талдауының механизмін қарастырған кезде, типтік BCA ерітіндісінде рН шамамен 11,25 болатын жоғары сілтілі ерітінді бар және бұл ерітіндідегі ингредиенттерге бицинхонин қышқылы, натрий карбонаты, натрий бикарбонаты, натрий тартраты және мыс (II) сульфат пентагидраты. Бұл талдау, ең алдымен, екі химиялық реакцияға байланысты: ақуыздағы пептидтік байланыстар арқылы мыстың (II) мыс (I) -ке дейін тотықсыздануы және бицинхонин қышқылының екі молекуласының мыс (I) ионымен хелациялануы, нәтижесінде күлгін түсті кешен пайда болады. 562 нм толқын ұзындығында жарықты сіңіреді. Бірінші реакцияда пептидтік байланыстармен тотықсызданған мыс (II) мөлшері үлгідегі ақуыз мөлшеріне пропорционал болады.
Бредфорд талдауы дегеніміз не?
Брэдфорд талдауы - ерітіндідегі ақуыз концентрациясын өлшеуге пайдалы спектроскопиялық аналитикалық әдіс. Бұл әдісті 1976 жылы Мэрион М. Брэдфорд жасаған және ол салыстырмалы түрде жылдам әрі дәл әдіс.
Белок пен Брэдфорд реагентінің түсті реакциясы
Біз бұл әдісті үлгідегі ақуыз мөлшерінің концентрациясын анықтау үшін пайдалана аламыз. Осы талдау кезінде үлгіде өтетін химиялық реакция тек үлгідегі ақуыздың аминқышқылдарының құрамына байланысты.
Белокты бағалаудың Брэдфорд әдісі
Бұл талдау әдісін қарастырғанда, бұл Coomassie Brilliant Blue G-250 деп аталатын бояғыштың сіңіру ығысуына негізделген колориметриялық ақуыз талдауы. Жалпы, бұл бояғыш анионды (көк) формада, бейтарап (жасыл) және катиондық (қызыл) түрінде үш түрде болады. Сондықтан қышқылдық жағдайда бояғыш өзінің түсін қызылдан көкке өзгертеді. Бұл ақуыздың бояғышпен байланысуына байланысты. Керісінше, егер бояғышпен байланыстыратын ақуыз болмаса, түс өзгермейді, ерітінді қызыл-қоңыр түске ие болады. Бұл бояғыш Ван-дер-Вааль күштері мен электростатикалық әсерлер арқылы ақуыздың карбоксил тобымен күшті, ковалентті емес кешен түзуге қабілетті.
BCA мен Брэдфорд талдауының айырмашылығы неде?
BCA және Брэдфорд талдауы ақуыз концентрациясын анықтаудың екі талдау әдісі болып табылады. Бұл екі талдаудың әртүрлі талдау принциптері және олардың дәлдіктеріндегі айырмашылықтары бар. BCA мен Брэдфорд талдауының негізгі айырмашылығы мынада: BCA талдауы уақытты қажет етеді және дәлдігі азырақ, ал Брэдфорд талдауы жылдам және дәл.
Келесі инфографика кесте түрінде BCA және Брэдфорд талдауы арасындағы айырмашылықтарды жинақтайды.
Қорытынды – BCA және Bradford Assay
BCA талдауы немесе бицинхонин қышқылының талдауы - ерітіндідегі ақуыздың жалпы концентрациясын анықтауда пайдалы биохимиялық талдау. Брэдфорд талдауы - ерітіндідегі ақуыз концентрациясын өлшеуге пайдалы спектроскопиялық аналитикалық әдіс. BCA мен Брэдфорд талдауының негізгі айырмашылығы мынада: BCA уақытты қажет етеді және дәлдігі азырақ, ал Брэдфорд талдауы жылдам және дәл.
