Негізгі айырмашылық – CFU және MPN
Колония құру бірлігі (CFU) және Ең ықтимал сан (MPN) үлгілердегі микроорганизмдерді санау үшін қолданылатын екі әдіс. Екі параметр де су үлгілеріндегі су сапасын және фекальды индикаторлық бактерияларды анықтау үшін қолданылады. Колония құру бірлігі – берілген үлгінің белгілі бір көлемінде немесе салмағында өміршең бактерия жасушаларының немесе саңырауқұлақ жасушаларының санын санау үшін қолданылатын өлшем. Бұл параметр үшін стандартты бірлік CFU/ml немесе CFU/g болып табылады. Ең ықтимал сан – сұйық үлгідегі өміршең бактерия жасушаларының санын өлшеу үшін қолданылатын басқа бірлік. CFU мен MPN арасындағы негізгі айырмашылық мынада: CFU қатты агар пластинасында өсетін бактериялық және саңырауқұлақ колонияларынан есептеледі, ал MPN сұйық ортада өсетін өміршең бактериялардан есептеледі.
CFU дегеніміз не?
Колония қалыптастыру бірлігі (CFU) – берілген үлгідегі өміршең бактерия немесе саңырауқұлақ жасушаларының санын өлшейтін параметр. Колония құраушы бірліктерді санайтын әдіс стандартты пластиналар саны деп аталады. Агар пластиналарында пайда болатын өміршең колониялар сұйықтар үшін үлгінің 1 мл (колония құраушы бірлігі) КТБ немесе қатты заттар үшін үлгінің 1 г (бір грамм колония түзетін бірлігі) үшін КҚБ ретінде көрсетіледі.
Үлгідегі CFU өлшеу үшін екі жалпы әдіс қолданылады. Олар жайылған табақ әдісі және құйма табақ әдісі. Бұл екі әдіске сериялық сұйылту деп аталатын әдіс қолдау көрсетіледі. Сериялық сұйылтылған үлгілер агар бетіндегі колониялардың санаулы санын алуға мүмкіндік береді. Үлгінің белгілі көлемін агар пластинасының бетіне таратуға немесе агармен араластырып, табақшаға құюға болады. Содан кейін пластина инкубацияланады және пайда болған колониялар есептеледі. Колониялар саны бастапқы үлгідегі микроорганизмдер санына қатысты. Тым көп колонияларды немесе тым аз колонияларды көрсететін тақталар санаудан шығарылады, себебі нәтижелер бұл пластиналарда статистикалық дәл болмауы мүмкін. Статистикалық түрде ең жақсы диапазон агар пластинасында 30 – 300 колония болып табылады. Сондықтан дәл санау үшін дұрыс тақталарды таңдау керек. Сериялық сұйылту жоғарыдағы функция үшін орындалады.
Плиталардағы өміршең колониялар санын есептегеннен кейін, CFU/мл келесі теңдеу арқылы есептелуі мүмкін.
CFU бір мл бастапқы үлгі=пластинадағы колониялар саны X сұйылту коэффициенті
Сұйылту коэффициенті=(1/ Пластинаның сұйылтуы)
Мысалы, 10-4 сұйылту пластинасында 149 колония алсаңыз, онда бастапқы үлгідегі 1 мл бактериялар санын келесідей есептеуге болады.:
CFU/мл=(149) x (1/10-4)
=149 × 104 немесе 1490000
=1. 49 x 106
01-сурет: Колония құру блогы
MPN дегеніміз не?
Ең ықтимал сан - КФБ/мл-ге балама өлшем. MPN сонымен қатар сұйық үлгідегі өміршең жасушаларды бағалайды. Ол сұйық культурада өсетін ағзаларды санайды және негізінен бактериологиялық әдіс болып табылады. Бұл әдіс әсіресе бактериялық жасушалардың төмен концентрациясы бар үлгілер үшін пайдалы; мысалы, сүт, ауыз су және т.б. MPN мәні 100 мл көлем үшін көрсетіледі. MPN ықтималдық теориясына негізделген статистикалық әдіске сүйенеді. 100 мл үлгідегі MPN мәндерін табуға арналған статистикалық кестелер бар. Бұл кестелер 95% сенімділік шегінде нәтижелерді көрсетеді.
MPN мәні көп түтік ашыту әдісі деп аталатын әдісті орындағаннан кейін есептеледі. Сәйкес қоректік ортасы бар түтіктердің үш жинағы үлгінің 10 мл, 1 мл және 0 сияқты үш түрлі көлемімен егіледі.1 мл және өсу үшін инкубацияланады. Инкубациялық кезеңнен кейін түтіктерге өсудің бар-жоқтығына + (оң) немесе – (теріс) балл беріледі. Оң және теріс нәтижелердің үлгісі микроорганизмдердің санын бағалау үшін статистикалық ықтималдықтардың MPN кестесімен салыстырылады. Содан кейін 100 мл үлгі үшін MPN мәні беріледі. MPN су үлгілерінде бар колиформды бактерияларды анықтау үшін кеңінен қолданылады.
02-сурет: MPN кестесі
CFU мен MPN арасындағы айырмашылық неде?
CFU және MPN |
|
| CFU – берілген үлгідегі өміршең бактерия немесе саңырауқұлақ колонияларының санын көрсету үшін қолданылатын өлшем. | MPN - CFU-ге балама шара және сұйық үлгідегі өміршең бактерия жасушаларының санын өлшейді. |
| Бірлік | |
| CFU/ml немесе CFU/g | MPN/100 мл |
| Есептеу | |
| CFU агар пластиналарында өскен колониялар санын санау арқылы есептеледі. | MPN түтіктердің оң және теріс үлгілерін MPN статистикалық кестесімен салыстыру арқылы есептеледі. |
| Сериялық сұйылту техникасы | |
| Сериялық сұйылту үлгілерді агар пластиналарына қоймас бұрын орындалады. | Сериялық сұйылту әдетте MPN есептелгенде орындалмайды |
| Әдістер | |
| Жаю пластина әдісі және құю пластина әдісі CFU алу үшін орындалатын әдістердің екі түрі болып табылады. | Бірнеше түтік ашыту – MPN мәнін алу әдісі. |
Қорытынды – CFU және MPN
Микробтардың өсуін өлшеу көптеген себептерге байланысты қажет. Тамақ өңдеу кәсіпорындарында тағамдағы микроорганизмдердің деңгейін және түрін өлшеу қажет. Тамақ өнеркәсібінде және медицинада зарарсыздандыру процедураларының тиімді қолданылуын қамтамасыз ету қажет. Ағынды суларды тазарту қондырғыларында микробтардың санын жүйелі түрде жүргізу қажет. Молекулалық биологияда процедураны оңтайландыру кезінде пластиналардағы колониялар санын өлшеу қажет. Демек, әртүрлі санау және өсуді өлшеу әдістері бар. CFU және MPN - әртүрлі салаларда кеңінен қолданылатын екі әдіс. CFU – берілген үлгідегі өміршең бактериялар мен саңырауқұлақтар колонияларының санының өлшемі. Ол стандартты пластиналарды санау әдісі немесе өміршең пластинкаларды санау әдісі арқылы есептеледі. MPN - сұйық үлгінің берілген көлеміндегі бактерия жасушаларының санын білдіретін тағы бір көрсеткіш. Ол көп түтік ашыту әдісі және MPN кестесі арқылы есептеледі. Бұл CFU мен MPN арасындағы айырмашылық.
CFU және MPN форматының PDF нұсқасын жүктеп алу
Осы мақаланың PDF нұсқасын жүктеп алып, дәйексөздерге сәйкес офлайн мақсаттарда пайдалануға болады. PDF нұсқасын мына жерден жүктеп алыңыз CFU және MPN арасындағы айырмашылық.
