pBR322 мен pUC19 арасындағы негізгі айырмашылық мынада: pBR322 - ұзындығы 4361 жұп плазмидтік вектор, ал pUC19 - ұзындығы 2686 негізгі жұп болатын плазмидтік вектор.
Клондау векторы – ағзада тұрақты түрде сақталуы мүмкін ДНҚ-ның кішкене бөлігі. Бұл сонымен қатар клондау мақсатында бөгде ДНҚ фрагментін енгізуге болатын ДНҚ-ның кішкене бөлігі. Векторда бөгде ДНҚ фрагментін векторларға ыңғайлы енгізуге мүмкіндік беретін маңызды мүмкіндіктер бар, мысалы, шектеу орындары, таңдалатын маркер, репортер гені және экспрессия элементі. Клондау алғаш рет E.coli. E. coli клондау векторларына плазмидалар, бактериофагтар, космидалар және бактериялық жасанды хромосомалар (BAC) жатады. Ең жиі қолданылатын векторлар – гендік инженерияланған плазмидалар. pBR322 және pUC19 - плазмидтік векторлардың екі түрі.
pBR322 дегеніміз не?
pBR322 - плазмидтік вектор. Бұл E. coli үшін кеңінен қолданылатын алғашқы клондау векторларының бірі. Бұл вектор алғаш рет 1977 жылы Калифорния университетінде, Сан-Францискода Герберт Бойердің зертханасында жасалған. Бұл ұзындығы 4361 жұп негізді құрайтын дөңгелек қос тізбекті ДНҚ.
01-сурет: pBR322
Бұл плазмидтік вектордың ерекше мүмкіндіктері бар. Әдетте оның екі антибиотикке төзімділік гені болады: ампициллинге төзімділікті кодтайтын bla гені (AmpR) ақуыз және тетрациклинге төзімділікті кодтайтын tetA гені (TetR) ақуыз. Оның үстіне, онда pMB1 репликациясының шығу тегі бар. Бұл плазмидтік векторда плазмида көшірме санының шектеушісін кодтайтын роп гені де бар. Сонымен қатар, бұл вектордың 40-тан астам шектеу ферменттері үшін бірегей шектеу орындары бар. Осы қырық шектеу орындарының он бірі TetR генінде жатыр. TetR генінің промоторында HindIII және ClaI шектеу ферменттері үшін екі шектеу орны бар. Сонымен қатар, AmpR генінде алты өте маңызды шектеу орны бар. pBR322 аз көшірме санын клондау векторы болып табылады. Ол шамамен бір бактерия жасушасына 20 плазмида көшірмелерін береді. Вектордың молекулалық салмағы 2,83×106 дальтон.
pUC19 дегеніміз не?
pUC19 - ұзындығы 2686 негізгі жұп болатын плазмидалық вектор. Бұл Йоахим Мессинг және әріптестері жасаған плазмидтік векторлар сериясының бірі. Бұл плазмидтер сериясы бойынша алғашқы жұмыс Калифорния университетінде жүргізілді. Бұл дөңгелек қос тізбекті ДНҚ.
02-сурет: pUC19
Бұл плазмидтік векторда маңызды мүмкіндіктер де бар. Оның β глактозидаза (lacz) генінің N терминалдық фрагменті бар. Сондай-ақ оның бірнеше клондау сайты (MCS) аймағы бар. Бұл аймақ lacz генінің 6 және 7 кодондарына бөлінеді. MCS аймағы көптеген шектеуді эндонуклеазаларды шектеу орындарын қамтамасыз етеді. β глактозидаза генінен басқа, pUC19 ампициллинге төзімділік генін де кодтайды (AmpR). Сонымен қатар, репликацияның бастауы pMB1 плазмидасынан алынған. pUC19 өлшемі кішкентай болғанымен, оның көшірме саны жоғары (бір бактерия жасушасына 500-700 көшірме). Бұл плазмидтік вектордың молекулалық салмағы 1,75×106 дальтон.
pBR322 мен pUC19 арасындағы қандай ұқсастықтар бар?
- pBR322 және pUC19 - плазмидтік векторлардың екі түрі.
- Олар coli үшін танымал клондау векторлары.
- Екі плазмидтік вектордың да pMB1 плазмидасының репликация формасының шығу тегі бірдей.
- Бұл векторларда бірнеше шектеу орындары бар.
- Екі плазмидтік векторда таңдалатын маркер ретінде ампициллинге төзімділік гені бар.
pBR322 мен pUC19 арасындағы айырмашылық неде?
pBR322 - ұзындығы 4361 жұп негізді құрайтын плазмидтік вектор, ал pUC19 - ұзындығы 2686 негізгі жұп болатын плазмидалық вектор. Осылайша, бұл pBR322 мен pUC19 арасындағы негізгі айырмашылық. Сонымен қатар, pBR322 - көшірме саны аз плазмида векторы, ал pUC19 - көп көшірме саны плазмида векторы.
Төмендегі инфографика pBR322 мен pUC19 арасындағы айырмашылықтарды қатар салыстыру үшін кесте түрінде ұсынады.
Қорытынды – pBR322 және pUC19
E.coli үшін ең жиі қолданылатын клондау векторлары гендік инженерияланған плазмидалар болып табылады.pBR322 және pUC19 - плазмидтік векторлардың екі түрі. pBR322 - ұзындығы 4361 жұп негізді құрайтын плазмидтік вектор, ал pUC19 - ұзындығы 2686 негізгі жұп болатын плазмидтік вектор. Сонымен, бұл pBR322 мен pUC19 арасындағы негізгі айырмашылық.
