Жасушалардың жалпы саны мен өміршең жасушалар санының негізгі айырмашылығы мынада: жалпы жасушалар саны үлгідегі тірі және өлі микробтық жасушаларды қоса алғанда, барлық жасушаларды бағалайды, ал өміршең жасушалар саны үлгідегі тірі микроб жасушаларын ғана бағалайды.
Популяциядағы ағзалардың санын есептеу тәжірибелік жұмыстардың көпшілігі үшін қажет деп саналады. Сондықтан біз үлгідегі микробтардың санын тікелей және жанама әдістер арқылы талдауға тырысамыз. Тікелей өлшемдер ұяшық сандарын тікелей санайтын әдістерді қамтиды. Жанама өлшемдер ұяшық санына қатысты болуы мүмкін кейбір параметрді өлшеуді қамтиды, мысалы, ұяшық тығыздығы, құрғақ салмақ және т.б. Кейбір әдістер тек үлгідегі тірі микроб жасушаларының санын анықтайды. Тіршілікке қабілетті жасушалар саны - осындай әдістердің бірі. Тікелей микроскопиялық санау микроскопты пайдалана отырып, белгілі ортадағы/үлгідегі барлық жасушалардың санын анықтайды. Сондықтан ол тірі және өлі жасушаларды да санайды. Бұл жалпы ұяшықтар санының бір түрі.
Жасушалардың жалпы саны дегеніміз не?
Жасушалардың жалпы саны – микроскоп пен санау камерасын (гемоцитометр) пайдаланып, ортадағы/үлгідегі белгілі көлемдегі барлық жасушаларды санауды қамтитын әдіс. Тіршілікке қабілетті сандардан айырмашылығы, тірі және өлі жасушалар да есептеледі. Демек, бұл бақылау кезінде өміршеңдік дақтары қолданылмаса, жалпы сан. Микроскопияда жасушаларды тікелей микроскоппен бақылап, санайды. Ол микробтық жасушалардан тұратын жасуша суспензиясын пайдаланады. Санау және дәл өлшеуді жеңілдету үшін үлгіні сұйылтуға болады. Жасушалардың өте жоғары/төмен концентрацияларында микроскоптың көмегімен жасушалардың жалпы санын алу қиын міндет болып табылады.
01-сурет: Санау камерасы – гемоцитометр
Санау камералары оңай, қымбат емес және жалпы ұяшықтар санын жылдам қабылдайды. Ең бастысы, санау камералары эукариоттарды да, прокариоттарды да санау үшін пайдалы. Жалпы ұяшықтар санын анықтау үшін белгілі көлемдегі таңдалған квадраттардағы ұяшықтарды санаймыз.
Тіршілікке қабілетті жасушалар саны дегеніміз не?
Тіршілікке қабілетті жасушалар саны - үлгідегі тірі микроб жасушаларын санау әдісі. Ол үлгідегі тірі жасушаларды ғана санайды. Тіршілікке қабілетті пластиналар саны, мембраналық фильтрация және ең ықтимал сан - өміршең жасушаларды санау әдістері аз. Бұл тәсілдер өсуге негізделген. Өміршең пластиналарды санау әдісі көптеген микробиологиялық салаларда, соның ішінде тамақ және сүт микробиологиясы, медициналық микробиология, қоршаған орта микробиологиясы, микробтық генетика, өсу ортасын әзірлеу және биотехнологияда қолданылатын қуатты әдіс.
Тіршілікке қабілетті бактерияларды санаудың ең кең тараған тәсілі агар ортасында колониялар құра алатын үлгіні пайдалану болып табылады. Пластиналарды санауды орындаудың екі негізгі жолы бар: тарелка техникасы және табақ құю техникасы. Үлгінің белгілі көлемін агар пластинасының бетіне таратуға немесе агарға араластыруға болады. Содан кейін пластина инкубацияланады, ал пайда болған колониялар есептеледі. Колониялар саны бастапқы үлгідегі микроорганизмдер санына байланысты. Өміршең сандар тек тірі және өсіп келе жатқан жасушаларды өлшейді.
02-сурет: өміршең пластиналар саны
Ең ықтимал сан (MPN) өмір сүруге қабілетті жасушалардың популяция тығыздығын бағалауға арналған пластиналарды санау әдістеріне балама болып табылады. Ол сұйық культурада өсетін ағзаларды санайды және осылайша негізінен бактериологиялық әдіс болып табылады. Бұл әсіресе организмдердің төмен концентрациясы үшін пайдалы, мысалы: сүт, ауыз су.
Мембраналық сүзу әдісі микробтар қаладағы сумен жабдықтаудағыдай өте сұйылтылған кезде қолайлырақ. Ол сұйықтықтың белгілі көлемін сүзгіден өткізіп, оны қоректік ортада инкубациялау арқылы ғана жасалады. Сүзгіде пайда болатын колониялар есептеледі және үлгінің бір миллилитріндегі бактериялар есептеледі.
Жасушалардың жалпы саны мен өміршең жасушалар санының қандай ұқсастықтары бар?
- Жасушалардың жалпы саны және өміршең жасушалар саны жасушалардың санын анықтайтын микробтық әдістердің екі түрі болып табылады.
- Олар микробиология зертханаларында жиі қолданылатын санау әдістері.
Жасушалардың жалпы саны мен өміршең жасушалар санының айырмашылығы неде?
Жасушалардың жалпы саны үлгідегі барлық тірі және өлі микроб жасушаларын санайды. Керісінше, өміршең жасушалар саны үлгідегі тірі жасушаларды ғана санайды. Сонымен, бұл жалпы жасушалар саны мен өміршең жасушалар саны арасындағы негізгі айырмашылық. Жасушалардың жалпы саны агар пластиналарындағы колониялардың өсуіне тәуелсіз, ал өміршең жасушалар саны өсуге негізделген әдіс болып табылады және ол агар пластиналарындағы микробтық колониялардың өсуіне байланысты.
Төмендегі инфографикада жалпы жасушалар саны мен өміршең ұяшықтар саны арасындағы айырмашылық жинақталған.
Жиынтық – жалпы жасушалар саны және өміршең жасушалар саны
Жасушалардың жалпы саны тірі және өлі микроб жасушаларын санайды, ал өміршең жасушалар тек тірі жасушаларды санайды. Осылайша, бұл жалпы жасушалар саны мен өміршең жасушалар саны арасындағы негізгі айырмашылық. Сондай-ақ, өміршең жасушалар саны жалпы жасушалар санына қарағанда өсуге негізделген әдіс болып табылады. Сонымен қатар, ол көрінетін колонияларды алғанша пластиналарды инкубациялауды қажет етеді. Тіршілікке қабілетті пластиналар саны, MPN және мембраналық фильтрация - өміршең жасушалар санын анықтаудың бірнеше әдістері, ал тікелей микроскопия және гемоцитометрді пайдалану - жалпы жасушалар санын анықтаудың екі әдісі.