ДНҚ мен РНҚ изоляциясының негізгі айырмашылығы мынада: ДНҚ оқшаулануы биологиялық жасушадан ДНҚ деп аталатын нуклеин қышқылының бір түрі алынатын процедура, ал РНҚ оқшаулануы - РНҚ деп аталатын нуклеин қышқылының түрі болатын процедура. биологиялық жасушадан алынған.
Нуклеин қышқылын оқшаулау төменгі ағындағы қолданбалардың кең ауқымындағы бастапқы нүкте болып табылады. Бастапқы үлгілердегі нуклеин қышқылдарының жоғары сапасы кейінгі ағынды қолданбалардың сәттілігінің негізгі факторы болып табылады. Нуклеин қышқылын оқшаулауды әртүрлі төменгі ағынды қолдану қадамдары үшін пайдалануға болатын таза үлгідегі нуклеин қышқылын алу қадамдары ретінде анықтауға болады. Нуклеин қышқылын экстракциялаудың мақсаты - жасуша мембранасын ыдырату және ДНҚ немесе РНҚ сияқты таза нуклеин қышқылдарын алу үшін липидтер мен ақуыздардың максималды жойылуына қол жеткізу.
ДНҚ изоляциясы дегеніміз не?
ДНҚ оқшаулау - бұл биологиялық жасушадан ДНҚ деп аталатын нуклеин қышқылының түрі алынатын әдеттегі процедура. ДНҚ-ны оқшаулау қаннан, мұздатылған тін үлгілерінен және парафинді тін блоктарынан ДНҚ алу арқылы жүзеге асырылады. ДНҚ-ны оқшаулаудың үш негізгі сатысы бар, соның ішінде жасуша лизисі, ДНҚ-ның экстракциясы және преципитация. Жасуша лизисінде үлгідегі жасушалар бір-бірінен жиі ұсақтау немесе құйындыру сияқты физикалық әдістермен бөлініп, құрамында тұзы бар ерітіндіге салынады. Әдетте, тұздағы оң зарядталған натрий иондары ДНҚ омыртқасының бойымен өтетін теріс зарядталған фосфат топтарын қорғауға көмектеседі. Кейінірек, бұл мембраналар бұзылған кезде ДНҚ бөлетін жасуша мембранасы мен ядроларындағы липидтерді ыдырату үшін жуғыш зат қосылады.
01-сурет: ДНҚ оқшаулануы
ДНҚ экстракциясы ДНҚ-ның таза үлгісін алу үшін орындалады. Көбінесе протеаза ферменті ДНҚ-мен байланысты ақуыздарды және басқа жасушалық ақуыздарды ыдырату үшін қосылады. Сонымен қатар, үлгіні сүзу арқылы жасушалық қоқыстардың бір бөлігін жоюға болады. Соңында, ДНҚ спиртті қолдану арқылы тұнбаға түседі. Сонымен қатар, егер ДНҚ көп болса, процедураның соңында сараң ақ тұнбаны байқауға болады.
РНҚ изоляциясы дегеніміз не?
РНҚ оқшаулау – биологиялық жасушадан РНҚ деп аталатын нуклеин қышқылының түрін алу процедурасы. Бұл процедура көбінесе РНҚ-ны бұзатын жасушалар мен тіндерде рибонуклеаза ферменттерінің болуымен қиындайды. Молекулярлық биологияда үлгілерден РНҚ бөліп алудың бірнеше әдістері қолданылады, мысалы, гуанидиний-тиоцианат-фенол-хлороформды экстракциялау.
02-сурет: РНҚ оқшаулануы
РНҚ оқшаулау әдетте жасуша лизисі және гомогенизациясы, биохимиялық процестерді сөндіру, нуклеин қышқылын бөлу, РНҚ алу, шикі тазарту және РНҚ сапасын бағалауды қамтитын бірнеше қадамдардан тұрады. Сүзгі қағазы негізіндегі лизис және элюция әдісі РНҚ экстракциясында жоғары өткізу қабілетіне ие. Сонымен қатар, сұйық азоттағы РНҚ ерітіндісін қолдану арқылы экстракциялау да өте пайдалы әдіс болып табылады, өйткені ол рибонуклеаза белсенділігін болдырмайды.
ДНҚ мен РНҚ изоляциясының қандай ұқсастықтары бар?
- ДНҚ және РНҚ оқшаулау - нуклеин қышқылын оқшаулау процедураларының екі түрі.
- Екі процедураның да жасуша лизисі, экстракциясы және тазарту сияқты негізгі қадамдары бар.
- Бұл процедуралар нуклеин қышқылының маңызды түрлерін оқшаулайды, олардың бірқатар төменгі ағынды қолданбалары бар.
- Олар зертханалық қондырғыларда жүргізіледі.
- Оларды өндірілген жинақтар арқылы орындауға болады.
ДНҚ мен РНҚ изоляциясының айырмашылығы неде?
ДНҚ изоляциясында биологиялық жасушадан ДНҚ деп аталатын нуклеин қышқылының бір түрі алынады, ал РНҚ оқшаулауында биологиялық жасушадан РНҚ деп аталатын нуклеин қышқылының түрі алынады. Осылайша, бұл ДНҚ мен РНҚ оқшаулау арасындағы негізгі айырмашылық. Сонымен қатар, ДНҚ оқшаулау әдетте шамамен рН 7-ден 8-ге дейін жүргізіледі, ал РНҚ оқшаулау әдетте рН 4,5 шамасында жүзеге асырылады.
Төмендегі инфографика ДНҚ мен РНҚ изоляциясының арасындағы айырмашылықтарды қатар салыстыру үшін кесте түрінде ұсынады.
Қорытынды – ДНҚ және РНҚ изоляциясы
ДНҚ және РНҚ оқшаулау - нуклеин қышқылын оқшаулау процедураларының екі түрі. ДНҚ оқшаулау - бұл биологиялық жасушадан ДНҚ алынатын процедура. РНҚ изоляциясы - бұл биологиялық жасушадан РНҚ алынатын процедура. Демек, бұл ДНҚ мен РНҚ изоляциясының негізгі айырмашылығы.
