Иммунопреципитация мен коиммунопреципитация арасындағы негізгі айырмашылық мынада: иммунопреципитация - бұл белгілі бір антидененің көмегімен ерітіндіден ақуызды тұндыратын әдіс, ал коиммунопреципитация - бұл белгілі бір антиденені пайдаланып ерітіндіден бүтін белок кешендерін тұндыру әдісі.
Антиген-антидене әрекеттесуі - иммундық реакция кезінде В жасушалары мен антигендер (белоктар) өндіретін антиденелер арасындағы ерекше химиялық әрекеттесу. Әдетте, еритін антигендер еритін антиденелермен еритін температурада және рН-да электролиттің қатысуымен қосылып, ерімейтін көрінетін комплекс жасайды. Бұл преципитация реакциясы деп аталады. Сондықтан иммунопреципитация және коиммунопреципитация - антигендер сияқты ақуыздарды анықтау үшін зертханаларда жүйелі түрде қолданылатын преципитация реакцияларының екі түрі.
Иммунопреципитация дегеніміз не?
Иммунопреципитация – белгілі бір антиденені пайдаланып ерітіндідегі ақуызды тұндыру әдісі. Кейде бұл әдіс жеке ақуызды иммунопреципитация деп те аталады. Иммунопреципитация жасуша лизатынан таңдалған ақуызды бөліп алу үшін антиденені пайдаланады. Антидене өзінің арнайы мақсатты ақуызын немесе антигенді қоспадан тазартады. Антидене белокпен байланысады, ал антидене-антиген кешені үлгіден шығарылады. Тәжірибелік қондырғыда антиген-антидене кешені протеин A/G қосылған агароза немесе магниттік моншақтарды пайдаланып шығарылады. Кейінірек моншақтар жуылады, ал қызығушылық протеин элюцияланады. Иммунопреципитация арқылы алынған тазартылған ақуыз немесе антиген ферментпен байланысты иммуносорбентті талдау (ELISA) және western blot (WB) сияқты әртүрлі әдістермен тексеріледі.
01-сурет: Иммунопреципитация
Сонымен қатар, оқшауланған ақуыздар немесе антигендер бастапқы реттілікке негізделген ферментативті ас қорыту үлгілерін пайдалану арқылы масс-спектрометрия арқылы сандық және анықталуы мүмкін. Иммунопреципитация экспериментін бастамас бұрын белгілі бір ескеру қажет: әдіс пішімін таңдау, ақуыздар мен моншақтарды байланыстыру, дұрыс бастапқы антидене мен изотипті таңдау және теріс бақылау.
Коиммунопреципитация дегеніміз не?
Коиммунопреципитация – бұл белгілі бір антидененің көмегімен ерітіндіден бұзылмаған ақуыз кешендерін тұндыру әдісі. Коиммунопреципитация әдетте белоктардың үлкен кешенінің мүшесі болып табылатын белгілі ақуызға (антигенге) бағытталған арнайы антиденені таңдау арқылы жұмыс істейді. Белгілі мүшені белгілі бір антиденемен нысанаға алу арқылы бүкіл ақуыз кешенін ерітіндіден шығаруға болады. Бұл кешеннің белгісіз мүшелерін анықтауға мүмкіндік береді. Ерітіндіден ақуыз кешендерін шығару концепциясы кейде «төмен тарту» механизмі деп аталады.
02-сурет: B Коиммунопреципитация
Коиммунопреципитация – белок пен ақуыздың өзара әрекеттесуін талдау үшін қолданылатын қуатты әдіс. Коиммунопреципитацияның негізгі мақсаты - мүдделі ақуызға лигандтар, кофакторлар немесе сигналдық молекулалар сияқты өзара әрекеттесетін серіктестерді анықтау. Сонымен қатар, коиммунопреципитация ақуыздарды сарысудан, жасуша лизатынан, гомогенизацияланған тіннен немесе шартты ортадан бөлу үшін қолданылатын тиімді әдіс болып табылады.
Иммунопреципитация мен коиммунопреципитацияның қандай ұқсастықтары бар?
- Иммунопреципитация және коиммунопреципитация - преципитация реакциясына негізделген әдістердің екі түрі.
- Екі әдіс те арнайы антидене арқылы мақсатты антигенді анықтау үшін пайдаланылуы мүмкін.
- Екі әдіс те антиген-антидене әрекеттесуіне қатты тәуелді.
- Олар әдетте клиникалық зертханаларда қолданылады.
Иммунопреципитация мен коиммунопреципитацияның айырмашылығы неде?
Иммунопреципитация - бұл белгілі бір антидененің көмегімен ерітіндіден ақуызды тұндыру әдісі, ал коиммунопреципитация - белгілі бір антиденені пайдаланып ерітіндіден бүтін белок кешендерін тұндыру әдісі. Осылайша, бұл иммунопреципитация мен коиммунопреципитация арасындағы негізгі айырмашылық. Сонымен қатар, иммунопреципитация зертханаларда жиі қолданылады, ал коиммунопреципитация зертханаларда жиі қолданылмайды.
Төмендегі инфографика иммунопреципитация мен коиммунопреципитация арасындағы айырмашылықтарды қатар салыстыру үшін кесте түрінде ұсынады.
Қорытынды – Иммунопреципитация және Коиммунопреципитация
Иммунопреципитация және коиммунопреципитация - антиген-антидене әрекеттесуіне байланысты преципитация реакциясына негізделген әдістердің екі түрі. Иммунопреципитация әдісі белгілі бір антиденені пайдаланып ерітіндіден ақуызды тұндырады, ал коиммунопреципитация әдісі нақты антиденені пайдаланып ерітіндіден бүтін белок кешендерін тұндырады. Сонымен, бұл иммунопреципитация мен коиммунопреципитация арасындағы айырмашылықты қорытындылайды.
