RP HPLC пен HIC арасындағы негізгі айырмашылық мынада: RP HPLC неғұрлым полярлы жылжымалы фазаны және аз полярлы стационарлық фазаны пайдаланады. Ал HIC оған гидрофобты молекулалардың қосылуына мүмкіндік беретін гидрофобты стационарлық фазаны пайдаланады.
Хроматография – қоспаны құрамдас бөліктерге бөлуге көмектесетін аналитикалық әдіс. Алдымен ерітіндіге бөлінетін үлгіні еріту керек. Бұл ерітінді-зат қоспасы жылжымалы фаза деп аталады. Содан кейін жылжымалы фаза стационарлық фаза деп аталатын басқа материал арқылы өтеді. Қозғалмайтын фаза компоненттердің бөлінуін анықтайды. Бөлу жылжымалы фаза мен стационарлық фаза арасындағы материалдың бөлінуіне байланысты болады.
RP HPLC дегеніміз не?
RP HPLC термині кері фазалық жоғары өнімді сұйықтық хроматографиясын білдіреді. Ол гидрофобтылығы бойынша қоспадағы компоненттерді бөлуді қамтиды. Жылжымалы фазадағы гидрофобты компоненттер стационарлық фазадағы иммобилизацияланған гидрофобты лигандтармен байланысады, ал гидрофильді компоненттер стационар фазаның бетіне қосылмай стационарлық фаза арқылы элюцияланады.
01-сурет: HPLC аппараты
Сонымен қатар, бұл әдіс басқа хроматографиялық әдістермен салыстырғанда көбірек қайталану мүмкіндігіне ие және ол кең қолдану мүмкіндігін көрсетеді. Сондықтан біз бұл әдісті зертханаларда барлық HPLC әдістерінің 75%-дан астамында қолданамыз. Көбінесе жылжымалы фаза ретінде араласатын полярлы органикалық еріткіші бар судың сулы қоспасын қолданамыз. Осылайша, ол ерітіндідегі гидрофобты компоненттердің стационарлық фазаның бетіне бекітілуін қамтамасыз етеді.
HIC дегеніміз не?
HIC термині гидрофобты әрекеттесу хроматографиясын білдіреді. Бұл кері фазалық HPLC түрі және бұл әдіс негізінен ақуыздар сияқты үлкен биомолекулаларды бөлу үшін қолданылады. Бұл әдісте биомолекуланың үлгісін жасау үшін сулы ортаны пайдалану керек. Өйткені органикалық еріткіштер белоктардың денатурациясын тудыруы мүмкін. Сонымен қатар, бұл әдіс стационарлық фазаның сәл гидрофобты беті бар үлкен молекулалар арасындағы өзара әрекеттесуді пайдаланады. Сонымен қатар, біз үлгідегі жоғары тұз концентрациясын пайдалануымыз керек, себебі ол ақуыздың қаптамада сақталуын ынталандырады; бұл процесс тұздану деп аталады. Тұз концентрациясын бірте-бірте төмендету арқылы биомолекулаларды гидрофобтылығына қарай бөлек элюта жасай аламыз.
Әдетте бұл әдіс ион алмасу хроматографиясына қарама-қарсы шарттарды пайдаланады. Бұл әдістемеде алдымен үлгідегі еріген заттың ерітіндісін азайту үшін баған арқылы буферлік ерітіндіні өткізу керек. Ол ақуыздың гидрофобты аймақтарын ашады. Алайда, молекула гидрофобты болған кезде, байланыстыру үшін аз тұз қажет. Мұнда алдымен азырақ гидрофобты еріткіштер, ал тұз концентрациясының өзгеруіне сәйкес гидрофобты еріткіштер ең соңғы элюцияланады.
RP HPLC және HIC арасындағы айырмашылық неде?
Хроматография – қоспадағы компоненттерді бөлуге арналған аналитикалық әдіс. RP HPLC және HIC - екі мамандандырылған хроматографиялық әдіс. RP HPLC мен HIC арасындағы негізгі айырмашылық мынада: RP HPLC көбірек полярлы жылжымалы фазаны және аз полярлы стационарлық фазаны пайдаланады, ал HIC гидрофобты стационарлық фазаны пайдаланады, бұл оған гидрофобты молекулалардың қосылуына мүмкіндік береді.
Төмендегі инфографика RP HPLC және HIC арасындағы айырмашылықты қорытындылайды.
Қорытынды – RP HPLC және HIC
Хроматография – қоспадағы компоненттерді бөлуге арналған аналитикалық әдіс. RP HPLC және HIC - екі мамандандырылған хроматографиялық әдіс. RP HPLC мен HIC арасындағы негізгі айырмашылық мынада: RP HPLC неғұрлым полярлы жылжымалы фазаны және аз полярлы стационарлы фазаны пайдаланады, ал HIC гидрофобты стационарлық фазаны пайдаланады, бұл оған гидрофобты молекулалардың қосылуына мүмкіндік береді.
