HPLC мен жылдам HPLC арасындағы негізгі айырмашылық мынада: біз HPLC үшін қолданатын сорғы қысымы шамамен 40 МПа, ал жылдам HPLC үшін сорғы қысымы шамамен 3-5 МПа болады.
Қоспаның құрамдас бөліктерін бөлу үшін біз қолданатын ең көп таралған әдіс – «сұйық хроматография». Осы мақсатқа жетудің бірнеше әдістері бар, олардың ішінде HPLC өте танымал. HPLC сұйық қоспаның құрамдас бөліктерін жылдам және тиімді түрде анықтайтын, санын анықтайтын және бөлетін жоғары өнімді сұйықтық хроматографиясын білдіреді. Жылдам HPLC - бұл ерітінділерді зерттеумен айналысатындардың назарын кейінірек аударған HPLC арнайы қолданбасы.
HPLC дегеніміз не?
HPLC – жоғары өнімді сұйықтық хроматографиясы. Ол еріткіштерді колонка арқылы өтетін етіп итеру үшін жоғары қысымды пайдаланады. Сондай-ақ, бұл аминқышқылдары, нуклеин қышқылдары, көмірсулар, стероидтар, антибиотиктер және көмірсутектер сияқты әртүрлі қосылыстарды бөлу және зерттеудің тамаша тәсілі. HPLC жоғары ажыратымдылық пен жылдам талдау сияқты қоспаларды бөлудің басқа әдістеріне қарағанда көптеген артықшылықтарға ие. Ол қайта орау және регенерациялау қажеттілігін жояды және параметрлерді жақсырақ бақылауды ұсынады, осылайша бөлу тиімділігін арттырады. Ең дұрысы, HPLC ауқымды қолданбаларға сай келеді, өйткені ол өте ұсақ бөлшектерді ажырата алады және еріткіштердің оңай ағуын жеңілдететін жоғары қысымды пайдалануға мүмкіндік береді.
01-сурет: HPLC бағаны
Қысқаша айтқанда, HPLC техникасының жұмыс істеу әдісі келесідей. Біріншіден, біз сорғы арқылы дискретті аз мөлшерде үлгіні жылжымалы фаза ағынына енгізуіміз керек. Сорғы қысымын 40 МПа деңгейінде ұстау керек. Жылжымалы фазаның бұл ағыны HPLC бағанасы арқылы өтеді. Содан кейін үлгідегі компоненттер де баған арқылы өтеді. Бірақ олардың қозғалыс жылдамдығы бір-бірінен сынама компоненттері мен колонна ішіндегі адсорбенттің өзара әрекеттесуінің айырмашылығына байланысты ерекшеленеді. Біз бұл адсорбентті стационарлық фаза деп атаймыз, өйткені ол колоннаның ішінде орналасқан (қозғалмайтын). Содан кейін, бағанның соңында біз бағаннан шығарылатын үлгіні жинай аламыз, осылайша үлгідегі компоненттерді бөлек жинай аламыз.
Жылдам HPLC дегеніміз не?
Жақында Schering Plow ғылыми-зерттеу институтының зерттеуші ғалымдары HPLC-тің жетілдірілген нұсқасы болып табылатын жылдам HPLC әдісін әзірледі, өйткені ол қосылыстарды қоспадан тезірек бөлуге мүмкіндік береді. Сондай-ақ, жылдам HPLC ретінде белгілі, бұл әдіс 0,5 м кеуекті кремний диоксиді қатты кремний тотығының үстіне балқыту арқылы жасалған 2,7 м балқытылған негізгі кремний диоксиді бөлшектерін пайдаланады. Бұл бірегей жасалған бөлшектер бөлу процедурасын өте жылдам және бұл HPLC жүйесінде қолданатынға қарағанда төмен кері қысымда жасайды.
02-сурет: FPLC аппараты
Жылдам HPLC UPLC-мен салыстыруға болатын нәтижелерге қол жеткізеді, бірақ ғалымдар бұл әдісті артық деп санайды, өйткені ол өте қымбат өте жоғары қысымды жабдықты қажет етпейді. Ең кереметі, жылдам HPLC ешқандай жаңа зертханалық хаттамаларды қажет етпейді.
HPLC және Fast HPLC арасындағы айырмашылық неде?
HPLC жоғары өнімді сұйықтық хроматографиясы және жылдам HPLC - жоғары өнімді сұйықтық хроматографиясының жетілдірілген түрі. HPLC мен жылдам HPLC арасындағы негізгі айырмашылық мынада, біз HPLC үшін қолданатын сорғы қысымы шамамен 40 МПа. Ал жылдам HPLC үшін сорғы қысымы шамамен 3-5 МПа құрайды. Сонымен қатар, HPLC әдісі арқылы аминқышқылдары, нуклеин қышқылдары, көмірсулар, стероидтар, антибиотиктер және көмірсутектер сияқты әртүрлі қосылыстарды ажырата аламыз, ал жылдам HPLC әдісі негізінен белоктарды бөлу үшін қолданылады.
Төмендегі инфографикада HPLC және жылдам HPLC арасындағы айырмашылық туралы қосымша ақпарат берілген.
Қорытынды – HPLC және Fast HPLC
HPLC – бүкіл әлемде өте танымал болған сұйық хроматография әдісі. Fast HPLC - бұл HPLC жаңа нұсқасы, Schering Plow институтының зерттеушілері бұл жаңа техниканы әзірледі. HPLC мен жылдам HPLC арасындағы негізгі айырмашылық біз бөлу үшін қолданатын сорғы қысымында жатыр. Бұл; HPLC үшін пайдаланатын сорғы қысымы шамамен 40 МПа. Бірақ жылдам HPLC үшін сорғы қысымы шамамен 3-5 МПа болады.
