Негізгі айырмашылық – Грамдағы бояу мен қышқыл жылдам
Бактериялар өте ұсақ микроорганизмдер. Олар мөлдір, және оларды анықтау тірі және боялмаған жағдайда қиын. Осылайша, бактерияларды анықтауды жеңілдету үшін әртүрлі бояу әдістері жасалады. Бояу әдістерінің үш негізгі түрі бар: қарапайым бояу, дифференциалды бояу және құрылымдық бояу. Дифференциалды бояу - бактерияларды ажырату үшін бірнеше дақтарды пайдаланатын әдіс. Грам бояуы және қышқылға төзімді бояу ең танымал дифференциалды бояулар ретінде белгілі. Граммен бояу - бұл бактерияларды грам-оң бактериялар және грам-теріс бактериялар деп аталатын екі топқа бөлетін дифференциалды бояу әдісі. Қышқылға төзімді дақ қышқылға төзімді организмдерден микобактерия сияқты қышқылға төзімді организмдерді анықтау үшін қолданылатын дифференциалды бояу болып табылады. Бұл Грам бояуы мен қышқыл жылдам бояу арасындағы негізгі айырмашылық.
Грамдағы бояу дегеніміз не?
Грамдық бояу микробиологияда бактерияларды анықтау үшін қолданылатын маңызды дифференциалды бояу әдісі болып табылады. Бұл әдісті дат бактериологы Ганс Кристиан Грам 1884 жылы енгізді. Грам әдісімен бояу бактерияларды грам оң және грам теріс деп аталатын екі негізгі топқа бөледі, олар бактерияларды жіктеу мен идентификациялауда өте маңызды. Микробиологтар зерттеу барысында бактериалды сипаттаудың бастапқы қадамы ретінде граммен бояуды жүзеге асырады.
Бактериялар жасуша қабырғасының айырмашылығына қарай топтастырылған. Грам оң бактериялар жасуша қабырғасындағы қалың пептидогликан қабатынан, ал грам теріс бактериялар жасуша қабырғасындағы жұқа пептидогликан қабатынан тұрады. Граммен бояудың нәтижесі жасуша қабырғасының пептидогликан қабатының қалыңдығындағы айырмашылыққа негізделеді.
Граммен бояу төрт түрлі реагент арқылы орындалады, атап айтқанда; бастапқы дақ, мордант, түссіздендіргіш және қарсы дақ. Кристалл күлгін және сафранин сәйкесінше негізгі және қарсы дақ ретінде пайдаланылады, ал сәйкесінше грам йод және 95% спирт мордант және түссіздендіргіш ретінде пайдаланылады. Граммен бояудың негізгі қадамдары келесідей;
- Бактериялық жағынды таза шыны слайдқа дайындалады, қыздыру арқылы бекітіледі және салқындатылады.
- Жағынды 1 – 2 минут бойы кристалды күлгінмен толтырылады.
- Артық дақтарды кетіру үшін жағынды баяу ағынды ағынды сумен шайылады.
- Грам йод жағындыға 1 минут бойы жағылады.
- Жағынды ағынды ағынды сумен шайылады
- Жағынды 2 – 5 секунд ішінде 95% спиртпен жуылады және баяу ағынды ағын сумен шайылады.
- Жағынды 1 минут бойы сафранинмен қарсы боялады
- Жағынды баяу ағынды ағынды сумен шайылады, кептіріледі және микроскоп астында бақыланады.
Грамдық бояудың соңында грам теріс бактериялар қызғылт түсте, ал грам оң бактериялар күлгін түсте байқалады.
01-сурет: Грам теріс және грам оң бактерия
Граммен бояудың нәтижесі олардың жасуша қабырғасындағы пептидогликан қабатының қалыңдығына байланысты анықталады. Түссіздендіру сатысы кезінде бастапқы дақ пен мордан грам теріс бактериялардан оңай жойылады және оларда жұқа пептидогликан қабаты болғандықтан түссіз болады. Бастапқы дақ грам оң бактерияларда сақталады, өйткені оларда қалың пептидогликан қабаты бар. Қарсы дақ бастапқы дақтың сақталуына байланысты грам оң бактериялар үшін тиімді болмайды. Осылайша, грамм оң бактериялар негізгі дақ түсінде, яғни күлгін түсте көрінеді. Қарсы дақ грам теріс бактерияларды бояйды және олар сафранин түсі болып табылатын таңдалған түсте көрінеді. Демек, бактерияларды грамм бояуы бойынша екі топқа бөлу оңай және ол бактериялық дифференциация мен идентификацияда құнды.
Қышқыл жылдам дегеніміз не?
Қышқылға төзімділік - белгілі бір бактериялардың физикалық қасиеті, әсіресе бояу процедуралары кезінде қышқылдардың түссізденуіне төзімділігі. Бояғаннан кейін бұл организмдер сұйылтылған қышқылға және немесе этанолға негізделген көптеген бояу хаттамаларында жиі кездесетін түссіздендіргіш процедураларға қарсы тұрады. Осылайша, бұл организмдерге «қышқылдық жылдам» атауы берілген. Бұл қасиет олардың жасуша қабырғаларында балауыз материалының (миколь қышқылдары) жоғары деңгейіне байланысты көрінеді. Бұл сынақ туберкулез микобактериясын анықтау үшін өте маңызды.
2-сурет: қышқылға төзімді микобактериялар
Бұл қышқылға төзімді бояуды 1882 жылы Пол Эрлих әзірлеген. Эрлихтің қышқылға жылдам әдістемесін Зихл-Нилсен өзгерткен және ол қазір жиірек қолданылады. Қышқылды жылдам бояу процедурасы үш түрлі реагентті қамтиды. Негізгі бояу ретінде карбол фушин қолданылады. Түссіздендіргіш ретінде қышқыл спирт қолданылады. Қарсы дақ ретінде метилен көк қолданылады. Бояу процедурасы келесідей орындалады.
- Слайдтағы бекітілген үлгіге негізгі бояу (карбол фуксин) жағылады (Барлық ұяшықтар қызыл түске боялады).
- Слайд 5 минут бойы бумен қыздырылады, бұл дақтарды ұяшықтарға дұрыс түсіреді.
- Одан кейін түссіздендіргіш ерітінді қосылады (Бұл қышқылға төзімді бактериялардан басқа барлық жасушалардан қызыл бояуды жояды).
- Метилен көкі қарсы дақ ретінде қосылады (Ол барлық түссізденген бактерия жасушаларын бояйды).
- Қышқылды тез бактериялар қызыл болып қалады, ал қышқыл емес бактериялар көк түске боялады.
Грамдағы бояу мен қышқыл жылдамының қандай ұқсастықтары бар?
- Грам бояуы және қышқыл жылдам - екі дифференциалды бояу әдісі.
- Екі әдіс те бактерияларды екі топқа бөледі.
- Екі әдіс те екі дақ пен бір түсті кетіруді пайдаланады.
Грамдағы бояу мен қышқыл жылдамының айырмашылығы неде?
Грам дақ және қышқыл жылдам |
|
| Граммен бояу - бактерияларды екі топқа грам-оң және грам-теріс бактерияларға бөлетін дифференциалды бояу әдісі. | Қышқылға төзімді дақ – қышқылға төзімді организмдерді қышқылға төзімді емес организмдерден анықтау үшін қолданылатын дифференциалды бояу. |
| Негізгі дақ | |
| Хрусталь күлгін – грамдық бояуда жиі қолданылатын негізгі дақ. | Карбол фуксин - қышқылды жылдамдату үшін қолданылатын негізгі дақ. |
| Түссіздендіруші агент | |
| 95% спирт грамды бояуда түссіздендіргіш ретінде пайдаланылады. | Қышқыл спирті тез қышқылда түссіздендіргіш ретінде пайдаланылады. |
| Даққа қарсы дақ | |
| Грам дақ қарсы дақ ретінде сафранинді пайдаланады. | Қышқылды тез дақ қарсы дақ ретінде метилен көкін пайдаланады. |
| Бақылау | |
| Грам теріс бактериялар таңдалған түсте, ал грам оң бактериялар күлгін түсте байқалады. | Қышқылға төзімді бактериялар қызыл түсте, ал қышқыл емес бактериялар көк түсте байқалады. |
Қорытынды – Грамдағы бояу және қышқыл жылдам
Тірі күйдегі микроорганизмдерді визуализациялау қиын. Сондықтан олардың қасиеттерін зерттеу үшін биологиялық бояулар мен бояу процедуралары кеңінен қолданылады. Дифференциалды бояу - бактерияларды ажырату үшін қолданылатын бояу әдісінің бір түрі. Грам бояуы және қышқылды тез бояу - бұл екі дифференциалды бояу әдісі. Граммен бояу грам теріс бактериялар мен грам оң бактерияларды жасуша қабырғаларының қалыңдығына қарай ажыратады. Қышқылға тез бояу жасуша қабырғасындағы микол қышқылының құрамы негізінде қышқылға төзімді бактерияларды қышқыл емес бактериялардан ажыратады. Бұл жылдам қышқыл мен грамм дақ арасындағы айырмашылық.
Gram Stain және Acid Fast қолданбасының PDF нұсқасын жүктеп алу
Сіз осы мақаланың PDF нұсқасын жүктеп алып, сілтеме жазбасына сәйкес офлайн мақсаттарда пайдалана аласыз. PDF нұсқасын мына жерден жүктеп алыңыз: Грамдағы бояу мен қышқыл жылдам арасындағы айырмашылық.
