Негізгі айырмашылық – RPMI және DMEM
Зерттеуге арналған зерттеулердің көпшілігі жануарлар жасушаларын өсіруді қамтиды, сондықтан бұл зерттеулер жануарлардың жасушалық желілерін ерекше өсу жағдайында ұстауды талап етеді. Жануарлардың жасушаларын өсіру дәрілік заттардың метаболизмін анықтау, ауруларды диагностикалау және қатерлі ісіктерді зерттеу үшін фармакологиялық зерттеулерде кеңінен қолданылады. Жасуша культурасының ортасы жануарлар жасушасы мәдениетінің маңызды аспектісі болып табылады. Дулбекконың модификацияланған бүркіт ортасы (DMEM) және Розуэлл Парк мемориалдық институты (RPMI) жануарлар жасушаларын өсіруде қолданылатын екі культура ортасы. RPMI - суспензия дақылында сүтқоректілердің жасушаларын өсіру үшін кеңінен қолданылатын орта. DMEM – аминқышқылдары мен дәрумендерінің концентрациясы төрт есеге дейін жоғарылаған базальды ортаның модификацияланған түрі. DMEM жабысатын дақылдардағы жасушаларды өсіруде қолданылады. Екі БАҚ арасындағы негізгі айырмашылық - бұл БАҚ мәдениетінің түрі. RPMI суспензия дақылдарында пайдаланылады, ал DMEM жабысқақ жасушаларды өсіру үшін қолданылады.
RPMI дегеніміз не?
RPMI немесе Roswell Park мемориалдық институты ортасы RPMI 1640 деп те аталады. Бұқаралық ақпарат құралының атауын БАҚ ашылған институт алған. Бұл орта әдетте жануарлар жасушаларының мәдениетінде, әсіресе сүтқоректілердің жасушаларының өсуі үшін қолданылады. Олар бастапқыда адам лимфоциттерін өсіру үшін жасалған.
Келесі ингредиенттер RPMI құрамына кіреді.
- Глюкоза
- pH индикаторы (фенол қызыл)\
- Тұздар (натрий хлориді, натрий гидрокарбонаты, динатрий фосфаты, калий хлориді, магний сульфаты және кальций нитраты)
- Аминқышқылдары
- Дәрумендер (и-инозитол, холин хлориді, пара-аминобензой қышқылы, фолий қышқылы, никотинамид, пиридоксин гидрохлориді, тиамин гидрохлориді, кальций пантотенаты, биотин және рибофлавин, цианокобаламин)
RPMI ерекшелігі - ортадағы фосфат концентрациясының жоғарылауы. RPMI 5% көмірқышқыл газы атмосферасында қолданылады. Бұл жасушаның өсуі үшін максималды және оңтайлы жағдайларды қамтамасыз етеді. Тасымалдағыштың рН мәні бикарбонатты буферлеу жүйесі арқылы 8,0 деңгейінде сақталады.
01-сурет: Петри табақшасындағы жасуша мәдениеті
Жасуша өсірудегі RPMI қолданбалары
- Адамның Т және В лимфоциттерін, сүйек кемігі жасушаларын және гибридоманы өсіру.
- Адамның ісік жасушаларын зерттеу үшін қолданылады.
DMEM дегеніміз не?
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) коммерциялық мақсатта дайындалған өзгертілген орта болып табылады. Орташа ұнтақтың бастапқы құрылымы сары. DMEM-де витамин концентрациясы төрт есеге дейін артады, осылайша ортадағы қоректік заттардың мазмұны артады.
DMEM сонымен қатар темір нитраты, натрий пируваты және серин мен глицин сияқты кейбір маңызды емес аминқышқылдары сияқты көбірек тұздарды қосу арқылы өзгертіледі. БАҚтағы глюкозаның құрамы да өзгереді. Бастапқы формула 1000 мг/л глюкозадан тұрады, ал DMEM-де концентрация 4500 мг/л дейін артады. DMEM сонымен қатар сарысу ортасын толықтыруды талап етеді, өйткені ол толық орта емес. Көбінесе DMEM ұрықтың сиыр сарысуымен (FBS) толықтырылады. FBS өсіру процесі үшін қажетті ақуыздар мен өсу факторларын қамтамасыз етеді.
Ортаның рН мәні натрий бикарбонатын қосқанда өзгереді. Натрий бикарбонатын қосқанға дейінгі ортаның рН мәні 6,80 – 7,40 шамасында, ал натрий бикарбонатын қосқаннан кейінгі рН 7,60 – 8,20 аралығында болады. Ортаның сақтау температурасы 2 – 8 0C.
02-сурет: DMEM
DMEM қолданбалары
- Тышқан эмбриондық жасушаларында полиомавирустың бляшка түзу қабілетін зерттеу.
- Байланысты тежеу зерттеулерінде.
- Тауық жасушасының дақылдарын зерттеу және талдауда.
RPMI және DMEM арасындағы қандай ұқсастықтар бар?
- RPMI және DMEM екеуі де жануарлар жасушасын өсіруде қолданылады.
- RPMI және DMEM медиасы да сұйық құрамдар.
- RPMI және DMEM медиаларында өсуге қажетті маңызды аминқышқылдары, витаминдер және бейорганикалық тұздар бар.
- RPMI және DMEM медиасы толық емес. Сондықтан сарысуды қосу керек.
- RPMI және DMEM медиасы көміртегі көзі ретінде глюкозаны пайдаланады.
- RPMI және DMEM медиасының екеуі де жоғары рН.
RPMI мен DMEM арасындағы айырмашылық неде?
RPMI және DMEM |
|
| RPMI - суспензия культурасындағы сүтқоректілердің жасушаларын өсіру үшін кеңінен қолданылатын орта. | DMEM – аминқышқылдары мен дәрумендері жоғарылатылған базальды ортаның өзгертілген түрі. |
| Қосымша фосфаттардың болуы | |
| RPMI-де ұсынылған. | DMEM-де жоқ. |
| Қолдану | |
|
Жасылысқан дақылдардағы жасушаларды өсіру үшін қолданылады. Ол үйренген,
|
| Мәдениет түрлері | |
| RPMI суспензия дақылдары үшін пайдаланылады. | DMEM ұяшық жабыстырылған дақылдар үшін пайдаланылады. |
Қорытынды – RPMI және DMEM
RPMI және DMEM екеуі де жануарлар жасушаларын өсіруде, әсіресе лимфоциттерді, соның ішінде in vitro жануарлардың жасушалық желілерін өсіру үшін кеңінен қолданылады. DMEM - қоректік заттардың концентрациясы жоғарылайтын модификацияланған базальды орта. RPMI Roswell Park мемориалдық институты әзірлеген және ол сонымен қатар жануарлар жасушаларын өсіруде әсіресе сүтқоректілердің лимфоциттері үшін қолданылатын орта болып табылады. Екі медиа да коммерциялық қол жетімді. Бұл RPMI мен DMEM арасындағы айырмашылық.
