Бәсекеге қабілетті және бәсекеге қабілетсіз ИФА арасындағы негізгі айырмашылық мынада: бәсекеге қабілетті ИФА тежелу антигенін пайдаланады, ал бәсекелес емес ELISA талдау үшін тежеу антигенін пайдаланбайды.
Ферментпен байланысты иммуносорбентті талдау (ИФА) – антиденелер, антигендер, белоктар және гликопротеиндер сияқты әртүрлі нысандарды анықтайтын иммунологиялық талдау. Бұл орындаудың жылдам және қарапайым әдісі. Сондықтан ол зерттеу және диагностикалық мақсаттарда жиі қолданылады. ИФА ферменттерді қолдануды және антидене мен антигенді арнайы байланыстыруды қамтиды. Реакциялардың пайда болу жолына байланысты ИФА төрт түрі бар: тікелей ИФА, жанама ИФА, сэндвич ИФА және ИФА тежелу. Тікелей, жанама және сэндвичтік ELISA бәсекеге қабілетсіз ELISA түрлері, ал ингибирлеу ELISA - толық ИФА түрі. Бұл мақаланың негізгі мақсаты - бәсекеге қабілетті және бәсекеге қабілетсіз ELISA арасындағы айырмашылықты талқылау.
Бәсекеге қабілетті ИФА дегеніміз не?
Бәсекелес ELISA сигнал кедергісін анықтау арқылы үлгідегі антиген концентрациясын өлшейді. Мұнда талдау ингибиторлық антигенді пайдаланады. Демек, бұл ELISA тежелудің бір түрі. Бұл процедура кезінде үлгіде бар антигендер белгіленген антидененің белгілі бір санымен байланысу үшін таңдалған анықтамалық антигенмен бәсекелеседі. Сонымен қатар, бұл процедура таңбаланған антидененің артық мөлшерімен үлгіні инкубациялаумен басталады. Сондай-ақ, эталондық антигенді көп ұңғыманы талдау тақтасында алдын ала жабу керек. Содан кейін үлгі қоспасы анықтамалық антигені бар талдау тақтасына қосылуы керек. Бос антиденелер үлгідегі антигеннің мөлшеріне байланысты анықтамалық антигенмен байланысады. Демек, антиген үлгісі көбірек болса, анықтамалық антиген азырақ анықталады. Осылайша, ол әлсіз сигнал жасайды.
01-сурет: ELISA
Керісінше, үлгіде антиген аз болған кезде, көбірек сілтеме антиген антиденелерді басып алып, күшті сигнал береді. Бәсекеге қабілетті ELISA үлгіде антигендердің аз мөлшері болған кезде күшті сигнал беретіндіктен, бәсекеге қабілетті ELISA антигендер саны аз үлгілер үшін де өте сезімтал талдау болып табылады.
Кейбір бәсекеге қабілетті ELISA жинақтарында таңбаланған антидененің орнына таңбаланған антиген пайдаланылады. Мұнда белгіленген антиген мен үлгі антиген бастапқы антиденемен байланысу үшін бәсекелеседі. Дәл осылай, үлгідегі антигеннің мөлшері төмен болғанда, антиденелермен байланысатын таңбаланған антигеннің мөлшері жоғары болады және күшті сигнал жасайды.
Бәсекеге қабілетсіз ИФА дегеніміз не?
ИФА төрт түрінің ішінде үш түрі бәсекеге қабілетсіз ELISA болып табылады. Олар тікелей ELISA, жанама ИФА және сэндвич ИФА. Барлық үш пішім де әдіснамаларында шамалы айырмашылықтармен бірге ELISA ортақ принципі бойынша жұмыс істейді.
Тікелей ELISA таңбаланған бастапқы антиденені пайдаланады. Демек, ол екіншілік антиденені қажет етпейді. Сондықтан тікелей ELISA басқа ELISA түрлеріне қарағанда жылдамырақ. Бастапқы антидене пластинадағы иммобилизацияланған мақсатты антигенмен тікелей байланысады. Демек, фермент-субстрат реакциясы көрінетін сигнал шығаратын болады.
02-сурет: сэндвич ELISA
Тікелей ИФА-дан айырмашылығы, жанама ELISA таңбаланбаған бастапқы антиденені және таңбаланған екіншілік антиденені ферментті пайдаланады. Біріншілік антидене иммобилизацияланған антигенмен байланысқаннан кейін, екіншілік антидене біріншілік антиденемен байланысады. Екіншілік антиденедегі фермент антигенмен әрекеттеседі және көрінетін сигнал береді. Сэндвич ELISA тікелей және жанама ИФА-дан ерекшеленеді. Мұнда антидене талдау тақтасының қабырғасына иммобилизацияланады.
Бәсекеге қабілетті және бәсекеге қабілетсіз ELISA арасындағы қандай ұқсастықтар бар?
- Бәсекеге қабілетті және бәсекеге қабілетсіз ELISA - иммуносорбентті талдау әдістерінің екі түрі.
- Олар өте икемді және сезімтал әдістер.
- Сонымен қатар, бәсекеге қабілетті және бәсекеге қабілетті емес ИФА ферменттермен байланысты иммундық талдаулар болып табылады.
- Сонымен қатар, екі әдіс те фермент-субстрат реакциясына байланысты сигнал жасайды.
Бәсекеге қабілетті және бәсекеге қабілетсіз ELISA арасындағы айырмашылық неде?
Бәсекелестік ИФА – арнайы антидененің шектеулі саны үшін талданатын антиген мен таңбаланған антиген арасындағы аяқталуға негізделген ИФА түрі. Екінші жағынан, бәсекеге қабілетсіз ИФА-да қызығушылық антигені мен анықтамалық антиген арасында мұндай бәсекелестік жоқ. Осылайша, бұл бәсекеге қабілетті және бәсекеге қабілетті емес ELISA арасындағы негізгі айырмашылық. Сол сияқты, бәсекеге қабілетті ИФА тежелу ELISA болып табылады, ал бәсекелес емес ИФА тежелу ИФА емес. Сонымен, бұл бәсекеге қабілетті және бәсекеге қабілетсіз ELISA арасындағы айырмашылық.
Сонымен қатар бәсекеге қабілетті ELISA қызығушылық антигеннің аз мөлшерін өлшеуге қолайлы. Бұл сезімтал әдіс. Екінші жағынан, бәсекеге қабілетсіз ELISA үлгідегі антигендердің санына тәуелді емес. Демек, бұл бәсекеге қабілетті және бәсекеге қабілетсіз ELISA арасындағы айырмашылық.
Төмендегі инфографика бәсекеге қабілетті және бәсекеге қабілетсіз ELISA арасындағы айырмашылықты салыстырмалы түрде түсіндіреді.
Қорытынды – бәсекеге қабілетті және бәсекелес емес ELISA
Бәсекеге қабілетті және бәсекеге қабілетсіз ELISA – ИФА немесе ферментпен байланысты иммуносорбент талдауларының екі негізгі түрі. Бәсекеге қабілетті және бәсекеге қабілетсіз ИФА арасындағы айырмашылықты қорытындылау кезінде бәсекеге қабілетті ИФА қызығушылық антигені мен антиденелердің шектеулі санына қатысты анықтамалық антиген арасындағы бәсекеге сүйенеді. Сондықтан бәсекеге қабілетті ELISA тежеу ELISA деп те аталады. Екінші жағынан, бәсекеге қабілетсіз ELISA мақсатты антигендер мен анықтамалық антигендер арасындағы бәсекеге сүйенбейді. Ол қызығушылық танытатын аналитке таңбаланған арнайы антидененің артық мөлшерін пайдаланады. Осылайша, бұл бәсекеге қабілетті және бәсекеге қабілетті емес ELISA арасындағы негізгі айырмашылық. Тікелей ELISA, жанама ИФА және сэндвич ИФА бәсекеге қабілетсіз ELISA үш негізгі түрі болып табылады.
