Негізгі айырмашылық – иммунофлуоресценция мен иммуногистохимия
Молекулалық биологиялық әдістерді қолданатын ауруларды диагностикалау клиникалық зертханалық технологияның дамып келе жатқан саласына айналды. Ол ағзадағы ДНҚ, РНҚ немесе экспрессиялық ақуыздарды талдау арқылы ауруды анықтауға және аурудың себебін түсінуге арналған барлық сынақтар мен әдістерді қамтиды. Молекулярлық диагностикадағы жедел жетістіктер жұқпалы және жұқпалы емес аурулар бойынша іргелі зерттеулер жүргізуге мүмкіндік берді. Олар ауруға қатысатын маңызды гендердегі немесе белоктардағы реттілік немесе экспрессия деңгейлеріндегі өзгерістерді анықтау үшін қолданылады. Иммунофлуоресценция (IF) және иммуногистохимия (IHC) - қатерлі ісік биологиясында кеңінен қолданылатын екі әдіс. IF - IHC түрі, мұнда флуоресценцияны анықтау әдісі моноклоналды және поликлоналды антиденелерді талдау үшін пайдаланылады, ал IHC моноклоналды және поликлоналды антиденелерді анықтау үшін химиялық негізделген әдістерді пайдаланады. Бұл IF және IHC арасындағы негізгі айырмашылық.
Иммунофлуоресценция (IF) дегеніміз не?
Иммунофлуоресценция – талдауда қолданылатын антиденелер анықтау мақсатында флуоресцентті бояғыштар немесе флуоресцентті ақуыздар арқылы таңбаланған анықтау әдісі. Белгіленген қайталама антиденелер қажетсіз фондық сигналдарды тудыруы мүмкін; сондықтан IF техникасы анықтау кезінде қажетсіз сигналдарды болдырмау үшін қазіргі кезде бастапқы антидененің өзін таңбалауға негізделген. Бұл әдіс арқылы бастапқы және қайталама антидене арасындағы спецификалық емес байланысуға жол берілмейді және ол жылдамырақ, өйткені қайталама инкубация қадамы жоқ. Деректер сапасы да жақсартылған.
01-сурет: BrdU, NeuN және GFAP үшін қос иммунофлуоресценциямен бояу
Фторхромдар немесе флуоресцентті бояғыштар радиацияны, жақсырақ қоздырылған ультракүлгін сәулені сіңіре алатын қосылыстар болып табылады. Бөлшектер қозған күйден негізгі күйге жеткенде, спектрді қалыптастыру үшін детектор арқылы түсірілетін және анықталатын сәуле шығарады. Флуоресцентті жапсырманың белгілі бір реакция үшін үйлесімді және тұрақты болуы өте маңызды және дәл нәтижелерге қол жеткізу үшін антиденеге дұрыс конъюгацияланған болуы керек. Ең көп қолданылатын фторхромдардың бірі - жасыл түсті, жұтылу және эмиссияның ең жоғары толқын ұзындығы сәйкесінше 490 нм және 520 нм болатын флуоресцеин изотиоцианаты (FITC). Родамин, IF-де қолданылатын басқа агент, қызыл түсті және 553 нм және 627 нм жұтылу және сәуле шығару шыңы толқын ұзындығына ие.
Иммуногистохимия (IHC) дегеніміз не?
IHC – мақсатты жасушада антигеннің болуын анықтау және растау үшін қолданылатын молекулалық сынақ әдісі. Мақсатты жасуша инфекциялық бөлшек, микробтық патоген немесе қатерлі ісік жасушасы болуы мүмкін. IHC мақсатты жасушалардың жасуша бетінде антигендердің болуын анықтау үшін моноклоналды және поликлоналды антиденелерді пайдаланады. Техника антиген-антидене байланысына негізделген. Белгілі бір антигеннің бар-жоғын анықтау үшін анықтау маркері осы антиденелермен конъюгацияланады. Бұл маркерлер ферменттер, флуоресцентті таңбаланған антиденелер немесе радиобелгіленген антиденелер сияқты химиялық маркерлер болуы мүмкін.
02-сурет: Иммуногистохимиямен боялған тышқан-ми тілімі
IHC ең танымал қолданбасы қатерлі ісіктердің болуын анықтау үшін рак клеткаларының биологиясында, бірақ ол жұқпалы ауруларды анықтау үшін де қолданылады.
Иммунофлуоресценция мен иммуногистохимияның қандай ұқсастықтары бар?
- Иммунофлуоресценция және иммуногистохимия in vitro жағдайында өтеді.
- Екі әдіс те антиген-антиденеге негізделген
- Екеуі де өте жылдам әдіс.
- Техникалардың нәтижелерін қайталауға болады.
- Екеуінде де деректер сапасы жақсарды.
- Бұл әдістер қатерлі ісік пен жұқпалы ауруларды диагностикалауда қолданылады.
Иммунофлуоресценция мен иммуногистохимияның айырмашылығы неде?
Иммунофлуоресценция және иммуногистохимия |
|
| IF – талдауда қолданылатын антиденелер анықтау үшін флуоресцентті бояғыштар немесе флуоресцентті ақуыздар арқылы таңбаланған анықтау әдісі. | IHC - талдауда қолданылатын антиденелер анықтау үшін химиялық заттар немесе радиоактивті элементтер арқылы таңбаланған анықтау әдісі. |
| Дәлдік | |
| IHC-пен салыстырғанда IF техникасында дәлдік жоғарырақ. | IHC дәлдігі төмен. |
| ерекшелік | |
| Егер нақтырақ болса. | IHC нақты емес. |
Қорытынды – Иммунофлуоресценция және иммуногистохимия
Молекулалық механизмдер медицина саласына көптеген өзгерістер әкеліп, диагностика саласында төңкерістерге әкелген озық молекулалық тестілеу әдістерін тудырды. Бұл өнертабыстар ауруды тез және дәл анықтауға және растауға әкелді, осылайша дәрі-дәрмектерді сәтті енгізуге және өндіруге мүмкіндік берді. Бұл әдістер фармакологияда дәрілік заттардың нысанасын табу және дәрілік заттардың метаболизмі кезінде препараттың фармакокинетикалық қасиеттерін растау үшін де қолданылады. IF және IHC екі диагностикалық әдіс болып табылады, олар антиген мен антиденелерді байланыстыру тұжырымдамасына негізделген, бірақ екі әдісте де анықтау әдісі әртүрлі. IF антигенді анықтау үшін флуоресценция принципін, ал IHC антигенді анықтау үшін химиялық конъюгация тұжырымдамасын пайдаланады. Бұл IF және IHC арасындағы айырмашылық.
Иммунофлуоресценция мен иммуногистохимияның PDF нұсқасын жүктеп алу
Сіз осы мақаланың PDF нұсқасын жүктеп алып, сілтеме жазбасына сәйкес офлайн мақсаттарда пайдалана аласыз. PDF нұсқасын мына жерден жүктеп алыңыз: Иммунофлуоресценция мен иммуногистохимияның айырмашылығы.
