Тікелей және жанама иммунофлуоресценцияның негізгі айырмашылығы мынада: тікелей иммунофлуоресценция қызығушылық нысанасына қарсы жұмыс істейтін бір антиденені пайдаланады, ал жанама иммунофлуоресценция қызығушылық нысанасын белгілеу үшін екі антиденені пайдаланады.
Иммунофлуоресценция немесе жасушалық бейнелеу - белгілі бір мақсатты антигенді фторформен белгілеу үшін қолданылатын әдіс. Мұнда флюорофор - бұл жарық қозу кезінде жарықты қайта шығара алатын флуоресцентті химиялық қосылыс. Флюорофор мақсатты антигенмен байланысқан кезде үлгідегі нысана молекуласын анықтауға мүмкіндік береді. Оны әрі қарай сипаттау үшін, антиген белгілі бір антиденемен байланысқанда, оны флюорофорлармен біріктіруге болады. Демек, флуоресцентті микроскоппен бақылау кезінде үлгідегі мақсатты антигеннің болуын анықтау оңай.
Сонымен қатар иммунофлуоресценцияның екі түрі бар; тікелей және жанама иммунофлуоресценция. Тікелей және жанама иммунофлуоресценцияның айырмашылығы негізінен қолданылатын антиденелер санына және флюорофор конъюгациясына байланысты. Яғни, тікелей иммунофлуоресценцияда флюорофор бастапқы антиденеге тікелей конъюгацияланады, ал жанама иммунофлуоресценцияда фторфор екіншілік антиденемен конъюгацияланады.
Тікелей иммунофлуоресценция дегеніміз не?
Иммунофлуоресценция арнайы мақсатты антигендерді анықтау үшін антиденелерді пайдаланады. Тікелей иммунофлуоресценция - иммунофлуоресценцияның екі түрінің бірі. Тікелей иммунофлуоресценцияда жалғыз антидене (бастапқы антидене) қатысады және флюорофор бастапқы антиденемен тікелей конъюгацияланады. Антиденені мақсатты антигенмен байланыстырғаннан кейін флуофор флуоресцентті микроскоппен анықталатын флуоресценция шығарады.
01-сурет: Тікелей иммунофлуоресценция
Алайда, тікелей иммунофлуоресценция қымбат әдіс болып табылады, өйткені бастапқы конъюгацияланған антиденелер қайталама антиденелермен салыстырғанда қымбат. Дегенмен, ол қосымша қадамды, яғни қысқарақ техниканы қамтымайды. Сонымен қатар, спецификалық емес байланыстар тікелей иммунофлуоресценцияда азаяды. Демек, түрлердің кросс-реактивтілігі төмен. Бірақ анықтау кезінде тікелей иммунофлуоресценцияның сезімталдығы жанама иммунофлуоресценциямен салыстырғанда әлсіз.
Жана емес иммунофлуоресценция дегеніміз не?
Жана емес иммунофлуоресценция – мақсатты антигенді таңбалауда бастапқы және қайталама антиденелер сияқты антиденелердің екі түрін қамтитын иммунофлуоресценцияның екінші түрі. Бұл әдісте фторфор екіншілік антиденемен конъюгацияланады. Демек, бұл әдіс қосымша қадамды қамтиды.
02-сурет: Иммунофлуоресценция
Алайда бұл әдісте сезімталдық жоғары, өйткені бірнеше флюорофорлар екіншілік антиденелермен конъюгациялануы мүмкін және бұл анықтауды жеңілдетеді. Сонымен қатар, жанама иммунофлуоресценция арзанырақ, себебі қайталама антиденелердің конъюгациясы арзанырақ және оңайырақ. Тікелей иммунофлуоресценциямен салыстырғанда, жанама әдісте түрлердің кросс-реактивтілігі жоғары.
Тікелей және жанама иммунофлуоресценцияның қандай ұқсастықтары бар?
- Бұл иммунофлуоресценция әдісінің екі түрі.
- Біріншілік антиденелер мен фторфор екі әдіске де қатысты.
- Сонымен қатар антиген-антидене реакциясы екі әдісте де орын алады.
- Сонымен қатар, тікелей және жанама иммунофлуоресценция антигенді анықтау үшін флуоресцентті микроскопты пайдаланады.
Тікелей және жанама иммунофлуоресценцияның айырмашылығы неде?
Иммунофлуоресценция қолданылатын антиденелермен фторфор конъюгациясы негізінде тікелей немесе жанама болуы мүмкін. Тікелей иммунофлуоресценцияда флюорофор бастапқы антиденемен конъюгацияланады, ол осы техникаға қатысатын жалғыз антидене болып табылады. Одан айырмашылығы, жанама иммунофлуоресценцияда флюорофор техникаға қатысатын антиденелердің екі түрінің бірі болып табылатын қайталама антиденемен конъюгацияланады. Демек, тікелей және жанама иммунофлуоресценцияның негізгі айырмашылығы - флюороформен конъюгацияланатын антидене түрі.
Келесі инфографика тікелей және жанама иммунофлуоресценция арасындағы айырмашылықты қатар салыстырады.
Қорытынды – Тікелей және жанама иммунофлуоресценция
Иммунофлуоресценция – үлгідегі арнайы антигендердің болуын анықтау үшін қолданылатын әдіс. Бұл әдіс арнайы антиденелерді пайдаланады. Сондықтан антиденелер флуоресцентті микроскоптың көмегімен анықтау үшін флюорофорлармен конъюгацияланады. Сонымен қатар, иммунофлуоресценцияның екі түрі бар: тікелей және жанама иммунофлуоресценция. Тікелей иммунофлуоресценция бір антиденені және осы антиденеге тікелей конъюгацияланған флюорофорды қамтиды. Жанама иммунофлуоресценция екі антиденені қамтиды; біріншілік және екіншілік және екіншілік антиденеге конъюгацияланған флюорофор. Бірнеше қайталама антиденелер біріншілік антиденелермен және бірнеше флюорофорлар екіншілік антиденелермен қосыла алатындықтан, жанама иммунофлуоресценция тікелей әдіске қарағанда сезімтал әдіс болып табылады. Сонымен қатар, жанама әдіс тікелей әдіске қарағанда арзанырақ. Осылайша, бұл тікелей және жанама иммунофлуоресценция арасындағы айырмашылық.
