HEK293 пен HEK293t арасындағы негізгі айырмашылық мынада: HEK293 - адамның эмбриональды бүйрегінен алынған өлместендірілген жасуша сызығы, ол 5ДНҚ типті кесілген адам аденовирусымен трансфекцияланған, ал HEK293t - HEK293 бастапқы жасуша сызығынан алынған еншілес жасуша желісі. SV40 репликациясының шығу тегін тасымалдайтын плазмидтік вектормен трансфекцияланған.
Трансфекция әдетте олардың генотипі мен фенотипіне әсер ету үшін жасушаларға бөгде ДНҚ мен РНҚ енгізу процесі ретінде анықталады. Түрлі биологиялық, химиялық және физикалық әдістер арқылы бөгде нуклеин қышқылдарын осылайша енгізу жасушаның қасиеттерін өзгертуі мүмкін. Сайып келгенде, бұл жасуша контекстінде гендік функция мен ақуыз экспрессиясын зерттеуге мүмкіндік береді. HEK293 және HEK293t - трансфекцияға бейімділігіне байланысты көптеген жылдар бойы жасуша биологиясын зерттеуде кеңінен қолданылған екі жасуша желісі.
HEK293 дегеніміз не?
HEK293 - көптеген рекомбинантты ақуыздарды шығару үшін адамның 5ДНҚ типті кесілген аденовирусымен трансфекцияланған адамның эмбриондық бүйрегінен алынған өлместендірілген жасуша желісі. HEK293s бастапқыда 1973 жылы голланд биологы Алекс Ван дер Эб адам бүйрек жасушаларынан бөлініп алынды. Бұл жасушалар ұрықтың ұрықтың ұлпа культурасында өсірілді. Кейінірек оларды Ван дер Эб зертханасының постдокторлық қызметкері Фрэнк Грэм 5ДНҚ типті адам аденовирусымен трансфекциялады. Бұл ұяшық сызығы HEK293 деп аталды, себебі ол Фрэнктің 293rd тәжірибесі болды.
01-сурет: HEK293
Аденовирустық гендердің HEK жасуша геномына қосылуы бұл жасушаларға рекомбинантты ақуыздардың жоғары мөлшерін өте тиімді өндіруге мүмкіндік береді. Сонымен қатар, аденовирустық вектор CMV промотор аймағын қамтиды; демек, бұл тиімділікті одан әрі арттырады. Бұл жасуша сызығы ген экспрессиясын зерттеу үшін хост ретінде пайдаланылды. Бұл жасуша желісін биотехнология өнеркәсібі гендік терапияға арналған емдік ақуыздарды өндіру үшін де пайдаланады.
HEK293t дегеніміз не?
HEK293t - рекомбинантты ақуыздардың жоғары мөлшерін өндіру үшін репликацияның SV40 шығу тегі бар плазмидтік вектормен трансфекцияланған HEK293 бастапқы жасуша желісінен алынған еншілес жасуша желісі. HEK293t - SV40 үлкен Т антигенінің мутант нұсқасын білдіретін адамның жасушалық желісі. HEK293t Стэнфордтағы Мишель Карлос зертханасында SV40 үлкен Т антигенінің температураға сезімтал мутантын кодтайтын плазмидамен HEK29E жасуша желісін тұрақты трансфекциялау арқылы жасалды. Ол бастапқыда 293/tsA1609neo деп аталды. Себебі трансфекция неомицинге төзімділікті және SV40 үлкен T антигенінің tsA 1609 аллельінің экспрессиясын беретін жасуша желісін жасау үшін қолданылады.
02-сурет: HEK293t
SV40 үлкен Т антигенінің мутантты нұсқасының экспрессиясына байланысты репликацияның SV 40 шығу тегі бар трансфекцияланған плазмидалар рекомбинантты ақуыздың мөлшерін айтарлықтай арттыруы мүмкін. Бұл жасуша желісі әдетте биотехнологиялық өнеркәсіпте ақуызды экспрессиялау және рекомбинантты ретровирустарды өндіру үшін қолданылады.
HEK293 және HEK293t арасындағы қандай ұқсастықтар бар?
- HEK293 және HEK293t – трансфекцияға бейімділігіне байланысты жасуша биологиясын зерттеуде кеңінен қолданылған екі жасуша сызығы.
- Екі ұяшық сызығы да зертханалық жолмен алынған.
- Бұл жасуша желілері рекомбинантты ақуыз өндірісінің көлемін айтарлықтай арттыра алады.
- Олар адамның эмбриональды бүйрек жасушаларын плазмидтік вектормен трансфекциялау арқылы жасалады.
HEK293 және HEK293t арасындағы айырмашылық неде?
HEK293 – адамның эмбриональды бүйрегінен алынған, 5ДНҚ типті кесілген адам аденовирусымен трансфекцияланған өлместендірілген жасуша желісі. Керісінше, HEK293t - SV40 репликациясының шығу тегін тасымалдайтын плазмидтік вектормен трансфекцияланған HEK293 бастапқы жасуша сызығынан алынған еншілес жасуша желісі. Сонымен, бұл HEK293 және HEK293t арасындағы негізгі айырмашылық. Сонымен қатар, HEK293 SV40 үлкен Т антигенінің мутант нұсқасын білдірмейді. Екінші жағынан, HEK293t SV40 үлкен Т антигенінің мутант нұсқасын білдіреді.
Келесі инфографика HEK293 және HEK293t арасындағы айырмашылықтарды қатар салыстыру үшін кесте түрінде көрсетеді.
Қорытынды – HEK293 және HEK293t
HEK293 және HEK293t - тұрақты өсуі мен трансфекцияға бейімділігіне байланысты жасуша биологиясын зерттеуде кеңінен қолданылған екі жасуша желісі. HEK293 - адамның 5ДНҚ типті кесілген аденовирусымен трансфекцияланған эмбриональды адамның бүйрегінен алынған өлместендірілген жасуша сызығы, ал HEK293t - SV40 репликация бастауын тасымалдайтын плазмидтік вектормен трансфекцияланған HEK293 бастапқы жасуша сызығынан алынған еншілес жасуша желісі. Осылайша, бұл HEK293 және HEK293t арасындағы айырмашылықты қорытындылайды.
