Негізгі айырмашылық – ағын цитометриясы мен FACS
Жасуша теориясы контекстінде жасушалар барлық тірі ағзалардың негізгі құрылымдық және қызметтік бірлігі болып табылады. Жасушаларды сұрыптау - бұл физиологиялық және морфологиялық ерекшеліктеріне қарай әртүрлі жасушаларды бөлу үшін қолданылатын әдіс. Олар жасушаішілік немесе жасушадан тыс сипатта болуы мүмкін. ДНҚ, РНҚ және ақуыздардың өзара әрекеттесуі жасушаішілік интерактивті қасиеттер ретінде қарастырылады, ал пішіні, өлшемі және әртүрлі беткі белоктар жасушадан тыс қасиеттер ретінде қарастырылады. Заманауи ғылымда жасушаларды сұрыптау әдістемелері биологиялық зерттеулердегі әртүрлі зерттеулерге, сонымен қатар медицинадағы зерттеулер арқылы жаңа принциптерді орнатуға көмектесті. Жасушаларды сұрыптау әртүрлі әдістемелер бойынша жүргізіледі, олар аз құрал-жабдығы бар қарапайымды да, күрделі техниканы қолдану арқылы озық технологиялық әдістемелерді де қамтиды. Ағындық цитометрия, флуоресцентті белсендірілген ұяшықтарды сұрыптау (FACS), магниттік ұяшықтарды таңдау және бір ұяшықты сұрыптау негізгі қолданылатын әдістемелер болып табылады. Ағындық цитометрия және FACS жасушаларды оптикалық қасиеттеріне қарай саралау үшін әзірленген. FACS - ағынды цитометрияның мамандандырылған түрі. Ағындық цитометрия - бұл бір жасушаларды зерттеуге мүмкіндік беретін әртүрлі жасуша бетінің молекулаларына, өлшеміне және көлеміне сәйкес жасушалардың гетерогенді популяциясын талдау кезінде қолданылатын әдіс. FACS - бұл жасушалардың үлгі қоспасы жарықтың шашырауы мен флуоресценция сипаттамаларына сәйкес екі немесе одан да көп контейнерлерге сұрыпталатын процесс. Бұл ағын цитометриясы мен FACS арасындағы негізгі айырмашылық.
Ағындық цитометрия дегеніміз не?
Ағынды цитометрия – жасушаішілік молекулалар мен жасуша бетінің экспрессиясын зерттеу және анықтау және әртүрлі жасуша түрлерін анықтау және сипаттау үшін қолданылатын әдіс. Ол сондай-ақ жасуша көлемін және жасуша өлшемін анықтауда және оқшауланған субпопуляциялардың тазалығын бағалау үшін қолданылады. Бұл бір уақытта бір ұяшықтарды көп параметрлі бағалауға мүмкіндік береді. Ағын цитометриясы флуоресцентті таңбаланған антиденелердің арқасында пайда болатын флуоресценция қарқындылығын өлшеу үшін пайдаланылады, олар байланысты жасушалармен байланысатын ақуыздарды немесе лигандтарды анықтауға көмектеседі.
01-сурет: ағын цитометриясы
Жалпы, ағынды цитометрия негізінен үш ішкі жүйені қамтиды. Олар сұйықтар, электроника және оптика. Ағын цитометриясында ұяшықтарды сұрыптауда қолданылатын бес негізгі компонент бар. Олар, ағынды ұяшық (оларды тасымалдау және оптикалық зондтау процесі үшін ұяшықтарды туралау үшін пайдаланылатын сұйықтық ағыны), өлшеу жүйесі (әртүрлі жүйелер болуы мүмкін, соның ішінде сынап және ксенон шамдары, жоғары қуатты сумен салқындатылған немесе төмен қуатты ауамен салқындатылған лазерлер немесе диодты лазерлер), ADC; Аналогты сандық түрлендіргіш жүйесі, күшейту жүйесі және талдауға арналған компьютер. Сатып алу - бұл ағын цитометрінің көмегімен үлгілерден деректерді жинау процесі. Бұл процесс ағын цитометрімен қосылған компьютер арқылы жүзеге асырылады. Компьютерде бар бағдарламалық құрал ағын цитометрінен компьютерге берілетін ақпаратты талдайды. Бағдарламалық құрал сонымен қатар ағын цитометрін басқаратын эксперимент параметрлерін реттеу мүмкіндігіне ие.
FACS дегеніміз не?
Ағындық цитометрия контекстінде флуоресценциямен белсендірілген жасушаларды сұрыптау (FACS) - биологиялық жасушалар қоспасының үлгісін саралау және сұрыптау үшін қолданылатын әдіс. Ұяшықтар екі немесе одан да көп контейнерден бөлінген. Сұрыптау әдісі жасушаның жарық шашырауы мен флуоресценция сипаттамаларын қамтитын жасушаның физикалық ерекшеліктеріне негізделген. Бұл әрбір ұяшықтан шығарылатын флуоресценция сигналдарының сенімді сандық және сапалы нәтижелерін алу үшін қолдануға болатын маңызды ғылыми әдіс. FACS кезінде бастапқыда жасушалардың алдын ала алынған қоспасы; суспензия жылдам ағып жатқан сұйықтықтың тар ағынының ортасына бағытталған. Сұйықтық ағыны әрбір ұяшықтың диаметріне негізделген суспензиядағы ұяшықтарды бөлуге арналған. Суспензия ағынына діріл механизмі қолданылады, нәтижесінде жеке тамшылар пайда болады.
02-сурет: FACS
Жүйе бір ұяшықпен бір тамшы жасау үшін калибрленген. Тамшылар пайда болғанға дейін ағын суспензиясы әрбір ұяшыққа тән флуоресценцияны анықтайтын флуоресценцияны өлшеу аппаратының бойымен қозғалады. Тамшылардың пайда болу нүктесінде флуоресценцияның қарқындылығын өлшеу алдында сақинаға заряд индукцияланатын электрлік зарядтау сақинасы орналастырылады. Суспензия ағынынан тамшылар пайда болғаннан кейін, тамшылардың ішінде заряд ұсталып, содан кейін электростатикалық ауытқу жүйесіне енеді. Зарядқа сәйкес жүйе тамшыларды әртүрлі контейнерлерге жібереді. Зарядты қолдану әдісі FACS жүйесінде қолданылатын әртүрлі жүйелерге байланысты өзгереді. FACS жүйесінде қолданылатын жабдық флуоресценциямен белсендірілген ұяшықтарды сұрыптаушы ретінде белгілі.
Ағындық цитометрия мен FACS арасындағы қандай ұқсастық бар?
Ағынды цитометрия және FACS жасушаларды оптикалық қасиеттеріне қарай саралау үшін әзірленген
Ағындық цитометрия мен FACS арасындағы айырмашылық неде?
Ағынды цитометрия және FACS |
|
| Ағынды цитометрия – бір жасушаларды зерттеуге мүмкіндік беретін әртүрлі жасуша бетінің молекулаларына, өлшеміне және көлеміне сәйкес жасушалардың гетерогенді популяциясын талдау кезінде қолданылатын әдіс. | FACS - бұл жасушалардың үлгі қоспасы жарықтың шашырауы мен флуоресценция сипаттамаларына сәйкес екі немесе одан да көп контейнерге сұрыпталатын процесс. |
Қорытынды – Ағын цитометриясы және FACS
Жасуша барлық тірі ағзалардың негізгі құрылымдық және қызметтік бірлігі болып табылады. Жасушаларды сұрыптау - бұл жасушаларды оқшаулау және олардың жасушаішілік және жасушадан тыс қасиеттеріне қарай әртүрлі категорияларға бөлу процесі. Ағындық цитометрия және FACS - жасушаларды сұрыптаудағы екі маңызды әдіс. Екі процесс де жасушаларды оптикалық қасиеттеріне қарай ажырату үшін жасалған. Ағындық цитометрия - бұл бір жасушаларды зерттеуге мүмкіндік беретін әртүрлі жасуша бетінің молекулаларына, өлшеміне және көлеміне сәйкес жасушалардың гетерогенді популяциясын талдау кезінде қолданылатын әдіс. FACS - бұл жасушалардың үлгі қоспасы жарықтың шашырауы мен флуоресценция сипаттамаларына сәйкес екі немесе одан да көп контейнерлерге сұрыпталатын процесс. Бұл Flow Cytometry және FACS арасындағы айырмашылық.
Flow Cytometry және FACS нұсқасының PDF нұсқасын жүктеп алыңыз
Сіз осы мақаланың PDF нұсқасын жүктеп алып, сілтеме жазбасына сәйкес офлайн мақсаттарда пайдалана аласыз. PDF нұсқасын мына жерден жүктеп алыңыз: Ағын цитометриясы мен FACS арасындағы айырмашылық
