HPLC мен UPLC арасындағы негізгі айырмашылық мынада: HPLC өлшемі шамамен 5 микрометр болатын бөлшектерді талдауға мүмкіндік береді, ал UPLC шамамен 2 микрометрден әлдеқайда кішірек бөлшектерге мүмкіндік береді.
HPLC және UPLC екеуі де қосылыстың құрамдас бөліктерін бөлуге пайдалы сұйық хроматографиялық әдістер. HPLC мен UPLC арасындағы айырмашылықты білу үшін алдымен HPLC деген не екенін білуіміз керек. Себебі UPLC HPLC арнайы нұсқасы болып табылады және біз HPLC не екенін білсек, оны оңай түсіне аламыз.
HPLC дегеніміз не?
HPLC термині жоғары өнімділік сұйық хроматографияны білдіреді. Бұл қосылыстың әртүрлі құрамдас бөліктерін бөлу үшін қолдануға болатын әдіс. Сондай-ақ, бұл қоспаның құрамдас бөліктерін анықтау, мөлшерлеу және бөлу үшін ең көп қолданылатын әдіс. Сонымен қатар, бұл әдіс еріткіштерді колонка арқылы итеру үшін жоғары қысымды пайдаланады. Сонымен қатар, HPLC негізгі қолданбалары биохимияда қосылыстың құрамдас бөліктерін талдауға арналған. Бұл амин қышқылдарын, нуклеин қышқылдарын, ақуыздарды, көмірсутектерді, пестицидтерді, көмірсуларды, антибиотиктерді, стероидтерді және басқа да сансыз бейорганикалық заттарды бөлу және анықтаудың тамаша тәсілі.
01-сурет: Зертханадағы HPLC жүйесі
Қысқаша айтқанда, HPLC техникасының жұмыс істеу әдісі келесідей. Біріншіден, біз сорғы арқылы дискретті аз мөлшерде үлгіні жылжымалы фаза ағынына енгізуіміз керек. Сорғы қысымын 40 МПа деңгейінде ұстау керек. Содан кейін жылжымалы фазаның бұл ағыны HPLC бағанасы арқылы өтеді. Сондай-ақ үлгідегі компоненттер баған арқылы өтеді. Дегенмен, олардың қозғалыс жылдамдығы бір-бірінен ерекшеленеді. Бұл айырмашылық үлгі компоненттері мен колонна ішіндегі адсорбент арасындағы өзара әрекеттесулердің айырмашылығына байланысты туындайды. Біз бұл адсорбентті стационарлық фаза деп атаймыз, өйткені ол колоннаның ішінде орналасқан (қозғалмайтын). Екіншіден, бағанның соңында біз бағаннан шығарылатын үлгіні жинай аламыз. Онда үлгідегі әрбір құрамдас үшін сақтау уақыттарының айырмашылығын анықтай аламыз.
UPLC дегеніміз не?
UPLC термині өте жоғары өнімді сұйықтық хроматографиясын білдіреді. Бұл HPLC нұсқасы, бірақ жұмыс әдісі бірдей. Дегенмен, HPLC-ден айырмашылығы, бұл әдіс 2 микрометрлік ұсақ бөлшектер сияқты өте кішкентай бөлшектерді талдауға мүмкіндік береді.
02-сурет: UPLC құрылғысы
Сонымен қатар ол жылдамырақ талдауды қамтамасыз етеді. Бұл техникада үлгіні бағанға енгізу үшін 100 МПа сорғы қысымын қолданамыз. Демек, бұл жоғары қысым барлық үлгінің бағанға енгізілгенін растайды. Осылайша, бұл HPLC-мен салыстырғанда өте тиімді.
HPLC және UPLC арасындағы айырмашылық неде?
HPLC термині жоғары өнімді сұйықтық хроматографиясын білдіреді, ал UPLC термині өте жоғары өнімді сұйықтық хроматографиясын білдіреді. Сондықтан UPLC техникасы HPLC-тің дамыған нұсқасы болып табылады. Осылайша, жұмыс әдісі екі техника үшін де бірдей. Дегенмен, UPLC HPLC-мен салыстырғанда тиімдірек, себебі ол жоғары сорғы қысымын пайдаланады; HPLC үшін сорғы қысымы 40 МПа, ал UPLC үшін 100 МПа. Сондықтан бұл HPLC мен UPLC арасындағы айырмашылық. Ең бастысы, HPLC мен UPLC арасындағы негізгі айырмашылық HPLC өлшемі шамамен 5 микрометр болатын бөлшектерді талдауға мүмкіндік береді, ал UPLC шамамен 2 микрометрден әлдеқайда кішірек бөлшектерге мүмкіндік береді.
Қорытынды – HPLC және UPLC
UPLC - HPLC түрі. Осылайша, операция әдістері бірдей. Бірақ біз HPLC-мен салыстырғанда UPLC-де кейбір жақсартылған мүмкіндіктерді таба аламыз. Сондықтан HPLC мен UPLC арасында біршама айырмашылық бар. Дегенмен, HPLC пен UPLC арасындағы негізгі айырмашылық мынада: HPLC өлшемі шамамен 5 микрометр болатын бөлшектерді талдауға мүмкіндік береді, ал UPLC шамамен 2 микрометрден әлдеқайда кішірек бөлшектерге мүмкіндік береді.
