Трансформация және трансфекция
Трансформация және трансфекция – бөтен генді қабылдаушы жасушаға енгізу үшін қолданылатын екі қарапайым әдіс. Дегенмен, бұл әдістер хост немесе векторлық жүйелер түріне байланысты.
Жасуша трансформациясы дегеніміз не?
Трансформация – ашытқы мен бактерия жасушаларына гендерді енгізу үшін қолданылатын әдіс. Бұл әдіс әдетте гендердегі тұқым қуалайтын өзгерістерді тудырады, сондықтан геннің экспрессиясы тұрақты болып табылады. Бактериялық трансформацияны алғаш рет 1928 жылы Фредерик Гриффит енгізді. Содан кейін 1970 жылдардың басында бұл әдіс Е.coli. E. coli трансформация процесі кезінде жасушалар CaCl2 мұздай ерітіндісіне малынған. Бұл қадам E.coli жасушаларын сауатты етеді. Осыдан кейін құзыретті жасушалар плазмидтік ДНҚ-мен араласады және мұзда 20-30 минут бойы инкубацияланады. Содан кейін ДНҚ-ның жасушаға берілуін қамтамасыз ету үшін қысқа жылу соққысы беріледі. Соңында, жасушалар қоректік сорпаға орналастырылады және плазмидаларды орнату үшін 37 ° C температурада 60-90 минут ішінде инкубацияланады. Бұл қадамдар сәтті аяқталғаннан кейін, трансформацияланған жасушалар жасушалардың таралуы үшін қолайлы ортада орналастырылуы мүмкін. Трансформация тиімсіз әдіс ретінде қарастырылатындықтан, оны клондық банктерді дайындау үшін қолдануға болмайды.
Жасуша трансфекциясы дегеніміз не?
Трансфекция – әдетте сүтқоректілердің жасушаларына бөтен генді енгізу әдісі. Трансфекцияның екі әдісі бар; атап айтқанда, өтпелі трансфекция және тұрақты трансфекция. Өтпелі трансфекцияда ген экспрессиясы шектеулі уақытқа қол жетімді; осылайша, геннің өзгеруі уақытша экспрессияны тудырады. Бұл трансфекция әдісі қарапайым және жылдам; сондықтан оны жүйелі түрде қолдануға болады. Өтпелі трансфекцияның бір кемшілігі - кең ауқымды ақуыз синтезі жүйелеріне қолданудың қиындығы.
Тұрақты трансфекция кезінде мақсатты ген иесі жасушаның геномына біріктіріледі, осылайша ген экспрессиясы өтпелі трансфекцияға қарағанда тұрақты болады.
Трансформация мен трансфекцияның айырмашылығы неде?
• Трансформация – геннің прокариоттық жасушаға (бактериялық және ашытқы) енуі, ал трансфекция әдетте сүтқоректілердің жасушасына геннің енгізілуі деп аталады.
• Трансформация гендердегі тұқым қуалайтын өзгеріске әкеледі, ал трансфекция гендерде уақытша экспрессияға немесе тұрақты өзгерістерге әкелуі мүмкін.
