Генді күшейту мен генді клондау арасындағы негізгі айырмашылық мынада: генді күшейту полимеразды тізбекті реакция арқылы in vitro қызықты геннің көптеген көшірмелерін жасау процесі. Бірақ, генді клондау рекомбинантты плазмиданы жасау және оны иесі бактерияға айналдыру арқылы in vivo қызығушылық тудыратын геннің көптеген көшірмелерін жасау процесі болып табылады.
Ген – ақуызды кодтайтын ДНҚ-ның белгілі бір фрагменті. Ағзада мыңдаған гендер бар. Сонымен қатар, молекулалық биологиялық әдістерді қолдана отырып, маңызды гендердің ДНҚ тізбегін көбейтуге болады. Генді күшейту және генді клондау - осындай екі процедура. Екі процедура да қызығушылық тудыратын геннің көптеген көшірмелерін жасайды. Дегенмен, генді күшейту мен генді клондау арасында олардың әдістемесі бойынша айырмашылық бар.
Генді күшейту дегеніміз не?
Генді күшейту – бұл полимеразды тізбекті реакция арқылы белгілі бір геннің көшірмелерін жасау процесі. Генді күшейту үшін сол белгілі бір ағзаның ДНҚ-сы ДНҚ экстракциясының тиісті хаттамасы арқылы алынуы керек. Содан кейін бөлінген екі тізбекті ДНҚ-ны денатурациялау керек, бұл бөлінген бір тізбекті алады. Келесі қадам қызығушылық тудыратын геннің көшірмелерін жасау үшін ПТР реакциясын пайдалануды қамтиды. Сонымен қатар, ПТР қоспасында қажетті праймерлер, нуклеотидтер, ДНҚ-полимераза ферменті, ДНҚ үлгісі және басқа ингредиенттер бар. ҚХР бағдарламасының соңында қызығушылық генін күшейту орын алады.
01-сурет: генді күшейту
Сонымен қатар, генді күшейту белгілі бір ретті анықтаудағы, ағзаны анықтаудағы, ауруларды диагностикалаудағы және гендік кітапханаларды құрудағы және т.б. бастапқы қадам болып табылады.
Генді клондау дегеніміз не?
Генді клондау – гендік кітапханаларды жасауға немесе қызығушылық танытқан геннің көптеген көшірмелерін жасауға арналған гендік инженериядағы әдіс. Бұл процесс рекомбинантты плазмиданы жасауды және рекомбинантты плазмиданы қабылдаушы жасушаға, әсіресе бактериялық жасушаға айналдыруды қамтиды. Клон – бастапқы организмнің немесе молекуланың бірдей көшірмесі. Гендерді клондау мыңдаған ген клондарын жасай алады.
02-сурет: гендерді клондау
Қызықты ген анықталғаннан кейін оны белгілі бір организмнің геномынан оны арнайы рестриктазалармен шектеу арқылы бөлуге болады. Содан кейін ген фрагментін енгізу үшін бірдей шектеу ферментін пайдаланып, плазмидаларды (векторларды) ашу керек. Содан кейін рекомбинантты плазмид электропорация сияқты әртүрлі әдістерді қолдана отырып, иесі бактерияға айналады. Кейбір рекомбинантты плазмидтер қожайын бактерия жасушаларына енеді. Антибиотиктің көмегімен трансформацияланған бактерияларды іріктеуге, оқшаулауға және жаңа ортада өсіруге болады. Осылайша, бұл әдіс миллиондаған ген клондарын алуға көмектеседі.
Гендерді күшейту мен клондаудың қандай ұқсастықтары бар?
- Генді күшейту және генді клондау - екі молекулалық биологиялық әдіс.
- Бұл екі әдісте де белгілі бір ДНҚ тізбегі немесе ген миллион немесе мың есе көбейеді.
- Сонымен қатар, екі әдіс те көптеген ғылыми салалар үшін өте маңызды.
Генді күшейту мен генді клондау арасындағы айырмашылық неде?
Генді күшейту – ПТР деп аталатын in vitro әдісін пайдаланып белгілі бір геннің көшірмелерін жасайтын процесс. Екінші жағынан, генді клондау - бұл рекомбинантты векторларды құру және оларды тірі организмде көбейту арқылы in vivo әдісін қолдана отырып, белгілі бір геннің көшірмелерін жасайтын процесс. Сонымен, бұл генді күшейту мен генді клондау арасындағы негізгі айырмашылық. Сонымен қатар, генді күшейту бірнеше сағатты алады, ал генді клондау бірнеше күнді алады. Сондықтан біз мұны генді күшейту мен генді клондау арасындағы айырмашылық ретінде қарастыра аламыз. Сонымен қатар, генді күшейту процесі қателерді аз көрсетеді, ал генді клондау процесі көбірек қателерді көрсетеді.
Келесі инфографика генді күшейту мен генді клондау арасындағы айырмашылықты қорытындылайды.
Қорытынды – Гендерді күшейту және гендерді клондау
Генді күшейту - бұл in vitro жағдайында полимеразды тізбекті реакцияны пайдалана отырып, қажетті геннің көшірмелерін жасау процесі, ал гендерді клондау - рекомбинантты ДНҚ молекуласы мен тірі организм/хост арқылы қызықты геннің көшірмелерін жасау процесі. бактерия. Осылайша, бұл генді күшейту мен генді клондау арасындағы негізгі айырмашылық.
