Негізгі айырмашылық – In situ будандастыру және иммуногистохимия
Қатерлі ісік пен жұқпалы ауруларды диагностикалау – ісіктерді немесе жұқпалы жасушаларды, олардың көбеюін және жасушалардың даму орындарын анықтау және көптеген жұқпалы және жұқпалы аурулардың генетикалық негізін талдау мақсатында жаңа протеомика мен геномикаға негізделген әдістер қолданылатын танымал тренд. жұқпалы емес аурулар. Бұл дәрі-дәрмектің дәл өңделуіне және жобалануына және ауруларды емдеудің арнайы әдістерін жасауға әкеледі. In situ будандастыру (ISH) және иммуногистохимия (IHC) - бұл қатерлі ісік биологиясында кеңінен қолданылатын екі әдіс және in situ будандастыру мен иммунохимия арасындағы негізгі айырмашылық талдау процедурасында қолданылатын молекулаларда жатыр. ISH-де нуклеин қышқылы зондтары талдауда, ал IHC-де диагностикалық анықтау үшін моноклоналды және поликлоналды антиденелер пайдаланылады.
In Situ будандастыру (ISH) дегеніміз не?
In situ будандастыру – тіннің бір бөлігінде немесе бөлігінде, бүкіл ұлпада немесе жасушаларда тікелей орындалатын нуклеин қышқылын будандастыру әдісі. Бұл әдіс Уотсон Криктің қосымша негізді жұптау теориясына байланысты, нәтижесінде мутацияланған гендерді анықтай алатын немесе қажетті генді анықтай алатын ДНҚ-ДНҚ гибридтері немесе ДНҚ-РНҚ гибридтері пайда болады. Бір тізбекті ДНҚ тізбегі, қос тізбекті ДНҚ тізбегі, бір тізбекті РНҚ тізбегі немесе синтетикалық олигонуклеотид тізбегі гибридтеу техникасы кезінде зондтар ретінде пайдаланылады және бұл зондтар 5' ұшында радиоактивті фосформен таңбаланады немесе авторадиограмма арқылы сәйкестендіру процедуралары үшін. Қолданылатын зонд түріне және визуализация техникасының түріне байланысты ISH әдістерінің әртүрлі түрлері бар.
01-сурет: флуоресцентті In Situ будандастыру
ISH-тың көптеген қолданулары бар, негізінен жұқпалы аурулардың молекулалық диагностикасында қоздырғыштардың бар-жоғын анықтау және патогенді молекулалық диагностика арқылы растау үшін. Ол сонымен қатар даму биологиясы, кариотиптеу және филогенетикалық талдау және хромосомалардың физикалық картасын жасау салаларында қолданылады.
Иммуногистохимия (IHC) дегеніміз не?
IHC техникасында талданатын негізгі молекула антиген болып табылады. IHC кезінде моноклональды және поликлоналды антиденелер инфекция немесе қатерлі жасуша пролиферациясының күйі кезінде антигендердің болуын анықтау үшін қолданылады. Техника антиген-антидене байланыстыруға негізделген және бұл әдіс үшін фермент белгілері қолданылады; осындай қолданбалардың бірі - ELISA (ферментпен байланысты иммуносорбентті талдау). Маркерлер флуоресцентті тегтелген антиденелер немесе радио таңбаланған антиденелер болуы мүмкін.
02-сурет: Иммуногистохимия
IHC ісік жасушаларын анықтау үшін кеңінен қолданылады. Диагностикалық процедуралар ісікті анықтау және сипаттау үшін ісік жасушаларында бар антигендерге бағытталған. Дәл осындай процедура инфекция қоздырғыштарын диагностикалау үшін енгізілген. Моноклоналды және поликлондық антиденелер қажетті ақуыз мен енгізілген синтетикалық антидене арасындағы антидене-антиген байланыстыру реакциясын қосу арқылы әртүрлі ген өнімдерін талдау үшін де қолданылады.
In situ будандастыру мен иммуногистохимияның қандай ұқсастықтары бар?
- ISH және IHC өте ерекше реакциялар.
- Екі әдіс те өте дәл.
- Екі әдісті де қатерлі ісік пен жұқпалы ауруларды диагностикалауда қолдануға болады.
- Бұл әдістер стерильді in vitro орталарда орындалады.
- Екеуі де қайталанатын нәтиже беретін жылдам әдістер.
- ISH және IHC радио таңбалау және флуоресценция әдістері сияқты анықтау әдістерін пайдаланады.
In situ будандастыру мен иммуногистохимияның айырмашылығы неде?
In Situ будандастыру және иммуногистохимия |
|
| ISH – тіннің бір бөлігінде немесе бөлігінде немесе бүкіл тінде тікелей орындалатын нуклеин қышқылын будандастыру әдісі. | IHC - жасуша беттерінде орналасқан арнайы ақуыз маркерлері болып табылатын антигендердің бар-жоғын анықтау үшін моноклоналды және поликлоналды антиденелер қолданылатын әдіс. |
| Талданатын биомолекулалардың түрі | |
| ISH нуклеин қышқылдарын талдайды. | IHC ақуыз-антигендерді талдайды. |
| Биохимиялық реакцияның негізі | |
| ДНҚ-ДНҚ немесе ДНҚ-РНҚ арасындағы қосымша негіз жұптасуы осы техникада орын алады. | Антиген-антидене әрекеттесуі иммуногистохимияға қатысады. |
| Ферментпен байланысты анықтау әдістері | |
| Ферментпен байланысты анықтау әдістерін ISH жүйесінде пайдалану мүмкін емес. | Ферментпен байланысты анықтау әдістерін IHC-де қолдануға болады. |
Қорытынды – In situ будандастыру және иммуногистохимия
Молекулалық диагностика – аурудың көрінісіне әкелетін жасушаларда бар молекулалық маркерлерге негізделген қатерлі ісік немесе жұқпалы ауру, АИТВ немесе туберкулез сияқты жұқпалы емес ауруды анықтау үшін қолдануға болатын жылдам және растау әдістері.. Молекулалық маркерлер экспрессияланған белоктар түрінде немесе генетикалық деңгейде болуы мүмкін, олардың негізінде тиімділікті арттыру үшін әртүрлі жаңа әдістер енгізіледі және бұл әдістердің құны жоғары болса да, аз еңбекті қажет етеді. Осылайша, ISH ДНҚ-ДНҚ немесе ДНҚ-РНҚ гибридті түзілуіне байланысты, ал IHC антидене мен антиген арасындағы ерекше реакцияларға байланысты. Бұл in situ будандастыру арасындағы айырмашылық.
In situ гибридизациясының және иммуногистохимиясының PDF нұсқасын жүктеп алу
Сіз осы мақаланың PDF нұсқасын жүктеп алып, сілтеме жазбасына сәйкес офлайн мақсаттарда пайдалана аласыз. PDF нұсқасын мына жерден жүктеп алыңыз In situ гибридизациясы мен иммуногистохимиясының айырмашылығы.
