Негізгі айырмашылық – Трансформаторлар мен рекомбинанттар
Рекомбинация және трансформация гендік инженериядағы екі маңызды қадам болып табылады, мұнда организмнің сипаттамалары оның генетикалық материалымен манипуляциялау арқылы әдейі өзгертіледі. Рекомбинация – бөтен ДНҚ вектор геномына еніп, рекомбинантты ДНҚ молекуласы түзілетін процесс. Трансформация – рекомбинантты молекуланың қабылдаушы организмге енуінің келесі қадамы. Қабылдаушы жасуша немесе ағза рекомбинантты молекуланың экспрессиясын жеңілдетеді. Трансформаторлар мен рекомбинанттар арасындағы негізгі айырмашылық мынада: трансформанттар - бұл рекомбинантты молекуланы ішке қабылдайтын және экспрессияны жеңілдететін жасушалар немесе организмдер, ал рекомбинанттар - бөтен ДНҚ-ны оның геномына енгізуге және экспрессия үшін хост трансформаторларына тасымалдауға мүмкіндік беретін векторлар.
Трансформанттар дегеніміз не?
Трансформаторлар – экспрессия үшін рекомбинантты ДНҚ алынатын жасушалар немесе ағзалар. Бактериялар әдетте гендік инженерияда қабылдаушы организмдер ретінде пайдаланылады, өйткені оларды өсіру, көбейту және зертханалық жағдайларда өңдеу оңай және трансформация процесі басқа организмдерге қарағанда оңай. Гендік инженерияда қолданылатын ең танымал иесі бактерия - E coli бактериясы.
Трансформация процесі кезінде хост жасушалары рекомбинанттарды қабылдауға индукцияланады. Алайда кейбір хост жасушалары рекомбинантты молекулаларды қабылдамайды. Олар трансформанттар ретінде белгілі, ал ішінде рекомбинантты ДНҚ молекулалары бар жасушалар трансформанттар ретінде белгілі. Трансформацияланбайтындардан трансформаторларды таңдау молекулярлық биологиядағы таңдамалы маркерлердің көмегімен жүзеге асырылады. Таңдалатын маркерлер ДНҚ кірістіруімен бірге вектор геномына енгізіледі. Жиі қолданылатын таңдалатын маркерлер антибиотиктерге төзімді гендер болып табылады. Маркер гендер трансформациялардың дифференциациясын жеңілдетеді және процесті жалғастырады. Трансформация процесінен кейін бактерия антибиотикі бар ортада өсіріледі. Тек трансформациялар сол ортада өсе алады, өйткені олардың ішінде рекомбинанттар бар.
Рекомбинантты ДНҚ молекуласы қожайын ағзасының ішінде трансформацияланғаннан кейін, бөгде ДНҚ иесі жасуша геномына біріктірілуі немесе цитоплазмада интеграцияланбаған күйінде қалуы мүмкін. Алайда бөгде ДНҚ-ның экспрессиясы мен репликациясы қабылдаушы ағзада орын алып, процестен қажетті нәтиже береді.
Рекомбинанттар дегеніміз не?
Рекомбинант - құрамында бөгде ДНҚ бар рекомбинирленген геномы бар организм немесе жасуша. Рекомбинанттар гендік инженерия процесінің нәтижесі болып табылады. Олар қызықты гендерді енгізу және геномды өзгерту арқылы in vitro жасанды түрде құрастырылады. Көбінесе бактериялық плазмидалар мен бактериофагтар гендік инженерияда рекомбинанттар ретінде әрекет етеді. Оның әртүрлі ДНҚ-ның химерасы бар. Рекомбинантты ДНҚ молекуласы бөтен ДНҚ-ны қабылдаушы ағзаға тасымалдайды және оны қажетті өнімді экспрессияға және түзуге мүмкіндік береді.
Рекомбинантты молекулалар рестрикциялық эндонуклеазалар мен ДНҚ лигазалары арқылы құрастырылады. Қажетті ДНҚ фрагменті бастапқы организмнен бөлініп, трансформацияға арналған рекомбинантты жасау үшін векторға енгізіледі. Қызығушылық танытатын генді кесу және векторлық ағзаны ашу оларды біріктіру үшін үйлесімді жабысқақ ұштарды жасау үшін бірдей шектеу ферментінің көмегімен жасалуы керек. Бөтен ДНҚ векторлық геномға енгізілгеннен кейін ол рекомбинантты немесе рекомбинантты ДНҚ молекуласы ретінде белгілі.
02-сурет: рекомбинантты ДНҚ
Трансформаторлар мен рекомбинанттар арасындағы айырмашылық неде?
Трансформанттар және рекомбинанттар |
|
| Трансформаторлар – ішінде рекомбинантты ДНҚ молекуласы бар жасушалар. | Рекомбинанттар - өз геномына бөтен ДНҚ енгізілген тасымалдаушы молекулалар. |
| Шетелдік ДНҚ экспрессиясы | |
| Олар рекомбинантты ДНҚ-ны экспрессиялай алатын хост жасушалары. | Олар қожайын ағзада өзін-өзі көбейте алуы керек. |
| Таңдау | |
| Оңай өсіруге және көбейтуге болатын жасушалар хост жасушалары ретінде таңдалады. | Олар оңай шығарылатын және таңдалатын маркерлер болуы керек. |
Қорытынды – Трансформаторлар және рекомбинанттар
Трансформаторлар – ішінде рекомбинантты ДНҚ молекулалары бар жасушалар немесе организмдер. Рекомбинанттар – генетикалық рекомбинациядан өткен және геномдарында бөгде ДНҚ бар организмдер немесе жасушалар. Бактериялық жасушалар көбінесе трансформация үшін хост жасушалары ретінде пайдаланылады, ал плазмидалар мен бактериофагтар көбінесе рекомбинантты ДНҚ технологиясында векторлар ретінде пайдаланылады. Бұл трансформациялар мен рекомбинанттар арасындағы айырмашылық.
