Кері фаза мен қалыпты фазалық HPLC арасындағы негізгі айырмашылық мынада: кері фазалық HPLC полярлы емес стационарлы фазаны және полярлық жылжымалы фазаны пайдаланады, ал қалыпты фазалық HPLC полярлы стационар фазаны және аз полярлы жылжымалы фазаны пайдаланады.
Қалыпты фазалық HPLC - Цветт өсімдік сығындыларын бөлу кезінде пайдаланған HPLC әдісінің ең көне әдісі; ол шыны бағандағы борды пайдаланды. Бұл хроматографияның классикалық әдісі, оны «қалыпты» әдіс деп атауға әкелді. Кері фазалық HPLC, керісінше, ғалымдар жақында әзірлеген қалыпты техникаға қарама-қайшы.
Кері фазалық HPLC дегеніміз не?
Кері фаза HPLC – гидрофобты стационарлық фазаны қолданатын хроматографиялық әдіс. Барлық HPLC әдістерінің ішінде біз бұл әдісті оның кең қолдану мүмкіндігі мен қайталану мүмкіндігіне байланысты шамамен 70% пайдаланамыз. Стационарлық фаза полярлы емес, ал жылжымалы фаза полярлық.
Көбінесе ғалымдар жылжымалы фаза ретінде ацетонитрил немесе метанол сияқты араласатын, полярлы органикалық еріткішпен судың сулы қоспасын пайдаланады. Демек, талданатын заттар полярлы емес стационар фазамен әрекеттеседі.
Қалыпты фазалық HPLC дегеніміз не?
Қалыпты фаза HPLC – гидрофильді стационарлық фазаны қолданатын хроматографиялық әдіс. Бұл HPLC дәстүрлі әдісі, бірақ біз оны көп қолданбаймыз. Қозғалмайтын фаза полярлы, ал жылжымалы фаза полюссіз. Ең бастысы, бұл техниканың жылжымалы фазасы 100% органикалық. Бұл бұл үшін су пайдаланылмағанын білдіреді.
01-сурет: Талданатын заттағы компоненттердің полярлығына сәйкес қалыпты фазалық және кері фазалық HPLC хроматограммаларына арналған үлгі профилі.
Әдетте стационарлы фазада кремний диоксиді, циано, диол, аминмен байланысқан фазалар және т.б. болады. Жылжымалы фазаларға гексан, этилацетат және т.б. сияқты органикалық еріткіштер кіреді. Бұл әдіс еріткіштің немесе талданатын заттың молекулаларының бетінде сақталуына негізделген. полярлық стационарлық фаза.
Кері фаза мен қалыпты фазалық HPLC арасындағы айырмашылық неде?
Кері фаза HPLC – гидрофобты стационарлық фазаны қолданатын хроматографиялық әдіс. Бұл техниканың стационарлық фазасы полярлы емес, ал жылжымалы фаза полярлы. Сонымен қатар, ғалымдар кері фазадағы HPLC жылжымалы фазасы ретінде ацетонитрил немесе метанол сияқты араласатын, полярлы органикалық еріткішпен судың сулы қоспасын пайдаланады. Керісінше, қалыпты фазалық HPLC - бұл гидрофильді стационарлық фазаны қолданатын хроматографиялық әдіс. Бұл техниканың стационарлық фазасы полярлы, ал жылжымалы фаза полярлы емес. Бұған қоса, ғалымдар қалыпты фазалық HPLC жылжымалы фазасы ретінде гексан, этилацетат және т.б. сияқты органикалық еріткіштерді пайдаланады. Төмендегі инфографика кері фаза мен қалыпты фазалық HPLC арасындағы айырмашылықты кесте түрінде көрсетеді.
Қорытынды – кері фаза және қалыпты фаза HPLC
Кері фаза және қалыпты фазалық HPLC әдістері екі сұйық хроматографиялық әдіс болып табылады. Кері фаза мен қалыпты фазадағы HPLC арасындағы негізгі айырмашылық мынада: кері фазалық HPLC полярлық емес стационарлық фазаны және полярлық жылжымалы фазаны пайдаланады, ал қалыпты фазалық HPLC полярлық стационарлық фазаны және аз полярлы жылжымалы фазаны пайдаланады.
